【摘 要】
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目的探索金丝桃苷在高糖诱导的心肌细胞氧化应激损伤中的作用及其分子机制。方法高糖处理模拟心肌细胞氧化应激损伤。细胞分为5个组:正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖),高糖损伤模
【机 构】
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新乡市中心医院心血管内一科; 新乡医学院第一附属医院心内科;
【基金项目】
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河南省医学科技攻关计划基金资助项目(No.201602362)资助
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目的探索金丝桃苷在高糖诱导的心肌细胞氧化应激损伤中的作用及其分子机制。方法高糖处理模拟心肌细胞氧化应激损伤。细胞分为5个组:正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖),高糖损伤模型组(35mmol/L葡萄糖),低、中、高浓度金丝桃苷保护组(35mmol/L葡萄糖+4/8/20nmol/L金丝桃苷)。各组细胞培养48h后,CCK-8检测细胞存活力;流式细胞术分析细胞凋亡;通过流式细胞仪利用活性氧(ROS)检测试剂盒DCFH-DA分析ROS水平;超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒检测SOD和MDA水平;Western blot法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化(p)-AKT、核因子E2相关因子2(Nrf2)、p-Nrf2的表达;免疫荧光染色分析AKT的活化情况。结果与正常对照组比较,高糖损伤模型组细胞存活率降低,细胞凋亡率增高,ROS、MDA水平升高,SOD水平降低,PI3K相对表达量及AKT、Nrf2磷酸化水平(p-AKT/AKT和p-Nrf2/Nrf2的比值)降低,AKT阳性细胞数比率降低,以上差异均有统计学意义(P<0.05)。与高糖损伤模型组相比,金丝桃苷保护组(4、8、20nmol/L)细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,ROS、MDA水平降低,SOD水平升高,PI3K相对表达量及AKT、Nrf2磷酸化水平升高,AKT阳性细胞数比率升高,以上差异均有统计学意义(P<0.05)。结论金丝桃苷可通过激活PI3K/AKT/Nrf2信号通路保护心肌细胞免受高糖诱导的氧化应激损伤。
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