产丁二酸工程菌的构建及其厌氧发酵

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为了考察过量表达苹果酸酶对于E.coliNZNlll(1dhA::Kanpfl::Cam)]厌氧发酵产丁二酸的影响,将连接有苹果酸酶基因sfcA的表达载体pTrc99a.sfcA转化进NZN111中,构建了重组NZN111(pTrc99a-sfcA)。0.5mmol/LIPTG诱导8h后,测定的苹果酸酶比酶活为30.67u/mg,比受体菌提高了140倍。采用两阶段发酵模式,结果表明:过量表达的苹果酸酶在NZN111体内催化了从丙酮酸到苹果酸的逆向反应,丁二酸是发酵过程中积累的主要有机酸,且当加入0.7mm
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