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目的：介绍一种为临床细胞学治疗提供自体骨髓基质细胞（BMSCs）的分离纯化方法。方法：采用红细胞沉降和密度梯度离心相结合的分离纯化方法从骨髓血中分离BMSCs。台盼蓝染色实验测定BMSCs活力；对BMSCs进行CD44、CD34抗体免疫荧光显色，激光共聚焦显微镜观察。结果：BMSCs活性大于95％，纯度大于85％，细胞的纯度和均一性均符合中国卫生部第三类医疗技术的要求，已达到临床应用标准。结论：本细胞制备方法简单易行，可批量获得BMSCs，满足临床治疗的需要。