【摘 要】
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试验以突破噬菌体裂解酶Lysep3应用瓶颈为切入点,采用酵母表达系统对其进行重组表达以期降低生产成本,同时初步探究其体外抗菌活性和安全性,以期为临床试验提供数据参考。根
【机 构】
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中国农业科学院饲料研究所,农业农村部饲料生物技术重点实验室
【基金项目】
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中国农业科学院重大产出科研选题“饲用抗生素替代关键产品创制与产业化”(CAAS-ZDXT2018008),中国农业科学院科技创新工程“抗菌肽及抗生素替代品方向”(CAAS-ASTIP-2013-FRI-02)
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试验以突破噬菌体裂解酶Lysep3应用瓶颈为切入点,采用酵母表达系统对其进行重组表达以期降低生产成本,同时初步探究其体外抗菌活性和安全性,以期为临床试验提供数据参考。根据毕赤酵母密码子偏爱性优化并合成Lysep 3基因,将其连接至表达载体pPICZαA。经菌落PCR和测序验证后,将线性化重组载体pPICZαA-Lysep3电转化巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris X-33。重组酵母转化子经菌落PCR和摇瓶水平甲醇诱导重组蛋白初筛后,在5 L发酵罐中高密度发酵,发酵上清液经His-trap HPG
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