人睾丸前列腺素D合成酶重组表达质粒的构建与鉴定

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目的:构建高效表达人睾丸前列腺素D合成酶(htL-PGDS)的重组表达质粒。方法:以经测序证实为人L-PGDS的人睾丸L-PGDS cDNA为模板进行PCR扩增,得到编码L-PGDS的基因片段,用限制性内切酶RamH Ⅰ和EcoR Ⅰ进行酶切后,连接到经相同内切酶处理的原核表达载体pGEX-2T中。重组质粒pGEX-2T/htL-PGDS被进一步转化感受态大肠杆菌JM103,转化物接种到含氨苄青霉素的LB平板,37℃培养12~16h,挑取氨苄青霉素抗性菌落,并接种到含氨苄青霉素的LB液体培养基中,3
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