合真醒神香穴位贴敷和香熏预处理对大鼠卒中缺血再灌注损伤的保护作用机制研究

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目的 观察合真醒神香穴位贴敷和香熏预处理对大鼠卒中缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法 将72只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、穴位贴敷组、穴位贴敷对照组、香熏组、香熏对照组,每组12只.假手术组和模型组大鼠均正常饲养不予任何药物,穴位贴敷组予合真醒神香穴位贴敷预处理,穴位贴敷对照组予楠木粉黏合剂贴敷预处理,香熏组予合真醒神香香熏预处理,香熏对照组予楠木粉黏合剂香熏预处理.各组大鼠预处理14 d后,除假手术组外,其余各组建立大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,在缺血2 h再灌注24 h后,比较各组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积及梗死脑组织细胞凋亡率、海马区和皮质部细胞因子[包括白细胞介素1β(IL-1β)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]、凋亡相关蛋白[包括天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)]表达情况,观察梗死脑组织神经细胞形态和海马区尼氏小体形态变化情况.结果 模型组大鼠神经功能缺损评分较假手术组升高(P<0.05),穴位贴敷组和香熏组大鼠神经功能缺损评分较模型组均降低(P<0.05),且均低于本疗法对照组(P0.05).模型组大鼠脑梗死体积百分比较假手术组增加(P<0.05),穴位贴敷组大鼠脑梗死体积百分比较模型组减小(P<0.05),且均小于穴位贴敷对照组和香熏组(P<0.05).模型组大鼠梗死脑组织细胞凋亡率较假手术组升高(P<0.05),穴位贴敷组和香熏组大鼠梗死脑组织细胞凋亡率较模型组均降低(P<0.05),且均低于穴位贴敷组和香熏对照组(P0.05).镜下观察假手术组脑组织神经细胞形态和海马区尼氏小体形态均正常;模型组梗死脑组织可见大片神经细胞消失,细胞稀疏,排列紊乱,间质疏松,神经元、胶质细胞周围间隙明显增宽,神经纤维疏松,海马区尼氏小体明显减少,排列稀疏,形态不规则;穴位贴敷组和香熏组梗死脑组织神经细胞形态和海马区尼氏小体形态较模型组均有明显改善,而穴位贴敷对照组和香熏对照组表现与模型组类似.模型组大鼠海马区和皮质部IL-1β、IFN-γ、TNF-α水平较假手术组均增加(P<0.05);穴位贴敷组大鼠海马区和皮质部IL-1β、IFN-γ、TNF-α水平较模型组均下降(P<0.05),且均低于穴位贴敷对照组(P<0.05);香熏组大鼠仅海马区IL-1β、IFN-γ、TNF-α水平较模型组下降(P<0.05),且香熏组海马区IL-1β、IFN-γ、TNF-α水平和皮质部IFN-γ水平均低于香熏对照组(P<0.05);穴位贴敷组大鼠皮质部IL-1β、IFN-γ、TNF-α水平均低于香熏组(P<0.05).模型组大鼠Caspase-3、Bax、Bcl-2、Bax/Bcl-2水平较假手术组均增加(P<0.05);穴位贴敷组大鼠Caspase-3、Bax、Bax/Bcl-2水平较模型组均降低(P<0.05),Bcl-2水平较模型组升高(P<0.05),且各指标改善均优于穴位贴敷对照组(P<0.05);香熏组大鼠仅Caspase-3、Bax、Bax/Bcl-2水平较模型组均降低(P<0.05),且均低于香熏对照组(P<0.05);穴位贴敷组Bcl-2水平高于香熏组(P<0.05),Bax/Bcl-2水平低于香熏组(P<0.05).结论 合真醒神香穴位贴敷和香熏预处理对大鼠卒中缺血再灌注损伤均具有保护作用,可明显减轻神经功能缺损,减小脑梗死体积,减少细胞凋亡,其作用机制可能与降低海马区和皮质部IL-1β、IFN-γ、TNF-α 水平,抑制炎性反应,抑制缺血部位Caspase-3和Bax的表达,促进Bcl-2的表达,降低Bax/Bcl-2水平,发挥抗细胞凋亡作用有关,其中穴位贴敷干预的效果较香熏干预作用更为广泛,效果更佳.
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