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目的构建抑制多药耐药基因(MDR1)表达的RNAi腺病毒载体,探讨基因治疗改善癫痫多重耐药现象的可行性。方法根据大鼠MDR1基因序列,选择3个19nt的靶序列,设计并合成3对66nt含编码短发夹RNA(shRNA)序列的寡核苷酸,构建pSIREN—shuttle—MDR1重组质粒,测序分析正确后转染通过马桑内酯诱导的已表达多重耐药蛋白的大鼠星形胶质细胞,通过RT—PCR法测定多药耐药蛋白(P—gP)表达量,判断所设计的3条DNA序列对于P—gP表达的抑制作用。选择抑制效率最高的1个重组质粒,将其中的MDR