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研究了高效液相色谱法(HPLC)测定棉籽粕中游离棉酚含量的前处理方法。利用70%丙酮水溶液超声辅助提取棉籽粕中的游离棉酚,采用HPLC测定其含量,系统考察了提取条件对游离棉酚含量测定的影响。优化后的前处理条件为:液料比26:1,超声60min,提取1次。在此条件下,测定结果稳定性佳(RSD=2.06%),重复性好(RSD=1.62%),加标回收率在97.89%~101.17%之间。该方法可用于棉籽粕中游离棉酚含量的测定。