样品5.000 0g,加pH 6.8的磷酸缓冲溶液2.0mL、β-葡萄糖醛酸甙酶150μL混合,于55℃培养2h,冷却至室温,用乙醚5mL超声5min,提取2次。合并提取液,经氮气吹干后,加甲醇（3+7）溶液5mL溶解残渣,再经Oasis HLB固相萃取柱净化,用甲醇-乙腈（1+1）溶液5mL洗脱。净化液经氮气吹干,用乙腈（95+5）溶解并稀释至1mL后进行色谱分离,以HSS T3色谱柱为固定相,以不同体积比的乙腈和含0.1%（体积分数）甲酸的5mmol·L^-1乙酸铵溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱。质谱分析中采用电喷雾离子源和全信息串联质谱采集模式。14种内源性甾体激素的质量分数在一定范围内与其峰面积呈线性关系,检出限（3S/N）在0.5⁵.0μg·kg^-1之间。按标准加入法在3个浓度水平上进行回收试验,回收率在80.6%⁹9.2%之间,测定值的相对标准偏差（n=6）在1.1%⁷.9%之间。