【摘 要】
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目的 探讨沉默FOXC2基因对乳腺癌耐阿霉素MCF-7/ADR细胞耐药性的逆转作用及机制。方法 MCF-7/ADR细胞分为未转染组、control-shRNA组和FOXC2-shRNA组,RT-PCR检测三组细胞FOXC2 mRNA表达情况,Western blot检测三组细胞FOXC2蛋白表达情况。实验分为未转染组、空脂质体组、control-shRNA组及FOXC2-shRNA组,MTT法检测
【基金项目】
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湖南省科技厅临床医疗技术创新引导项目（2020SK50308）；
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目的 探讨沉默FOXC2基因对乳腺癌耐阿霉素MCF-7/ADR细胞耐药性的逆转作用及机制。方法 MCF-7/ADR细胞分为未转染组、control-shRNA组和FOXC2-shRNA组,RT-PCR检测三组细胞FOXC2 mRNA表达情况,Western blot检测三组细胞FOXC2蛋白表达情况。实验分为未转染组、空脂质体组、control-shRNA组及FOXC2-shRNA组,MTT法检测吡喃阿霉素（THP-ADM）作用下MCF-7/ADR细胞的增殖抑制率及半数致死浓度(IC50);流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期分布;Western blot检测FOXC2蛋白及乳腺癌耐药蛋白（BCRP）及EMT相关标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）及波形蛋白（Vimentin）表达变化。结果 与未转染组及control-shRNA组相比,FOXC2-shRNA组中FOXC2 mRNA及其蛋白表达明显降低（P <0.05）。MTT显示FOXC2-shRNA组细胞对THP-ADM化疗敏感性增加,IC50由（6.08±1.23）μg/ml降至（0.65±0.01）μg/ml（P<0.05）;同时该组细胞早期凋亡率为（20.35±0.12）%,明显高于未转染组、空脂质体组及control-shRNA组（P<0.05）,且S期及G0/G1期细胞比例减少及G2/M期细胞比例增多（P<0.05）;Western blot结果显示FOXC2-shRNA组细胞FOXC2、BCRP及间质性标志物Vimentin蛋白表达下降（P <0.05）,而上皮性标志物E-cadherin蛋白表达增加（P<0.05）。结论 通过RNA干扰沉默FOXC2基因表达可以诱导MCF-7/ADR细胞发生凋亡,能有效逆转MCF-7/ADR细胞对THP-ADM的耐药性,其可能通过调控EMT机制发挥作用。
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