人血管抑制素基因克隆、表达和生物活性分析

来源 :中山大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：rockman27

【摘要】

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应用PCR技术从人胎肝cDNA文库中扩增了人血管抑制素基因.将克隆的基因重组进酵母质粒pPIC9K获得含该基因的重组质粒pPIC9KA3.用电激法将质粒pPIC9K转化毕节酵母GS115,经PCR检

【作者】

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张爱联罗进贤张添元罗学斌

【机构】

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中山大学基因工程教育部重点实验室∥生物化学系

【出处】

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中山大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2003年3期

【关键词】

：

人血管抑制素基因表达毕节酵母 G418 血管生成 angiostatin gene expressionP^pastoris G418angiogenesi

【基金项目】

：

广东省广州市"225"科技工程项目

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应用PCR技术从人胎肝cDNA文库中扩增了人血管抑制素基因.将克隆的基因重组进酵母质粒pPIC9K获得含该基因的重组质粒pPIC9KA3.用电激法将质粒pPIC9K转化毕节酵母GS115,经PCR检测获得含人血管抑制素基因的酵母工程菌GS115(pPIC9KA3).再用G418筛选法,在含不同浓度的G418平板上筛选高拷贝整合的转化子.对高拷贝整合的转化子进行发酵培养和诱导表达.SDS-PAGE及Western印迹分析显示:表达产物约占胞外蛋白的43%,相当于94 mg/L,并具有免疫活性.并能抑制bFG

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