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目的 分析脑脊液肝素结合蛋白（HBP）、腺苷脱氨酶（ADA）、胆碱酯酶（CHE）对急性细菌性脑膜炎病原菌的鉴别诊断价值。方法 选择2016年1月至2020年11月首都医科大学附属北京潞河医院收治的急性细菌性脑膜炎患者128例的病历资料分析。依脑脊液病原体感染结果分为革兰阳性菌组（n=58）和革兰阴性菌组（n=70）。依据病情严重程度分为轻度组（n=35）、中度组（n=72）、重度组（n=21）。对比革兰阳性菌组和革兰阴性菌组患者的一般临床资料、脑脊液HBP、ADA、CHE水平。分析脑脊液HBP、ADA、CHE水平对急性细菌性脑膜炎病原菌的鉴别诊断价值。对比不同病情严重程度患者的脑脊液HBP、ADA、CHE水平。结果 革兰阳性菌组和革兰阴性菌组患者的一般临床资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。革兰阳性菌组和革兰阴性菌患者的脑脊液HBP、ADA比较，差异有统计学意义（t=5.924,5.650,P＜0.05）。革兰阳性菌组和革兰阴性菌组患者的脑脊液CHE比较，差异无统计学意义（t=0.587,P＞0.05）。脑脊液HBP、ADA、CHE水平对急性细菌性脑膜炎病原菌进行鉴别诊断分析，最佳截断值分别为213.82（ng/mL）、2.50（U/L）、151.63（U/L），约登指数分别为0.42、0.40、0.17。不同病情严重程度患者的脑脊液HBP、ADA、CHE比较，重度组＞中度组＞轻度组，差异有统计学意义（F=17.332、17.332、13.994,P均＜0.05）。结论 在急性细菌性脑膜炎患者的脑脊液标本中，HBP、CHE、ADA的水平均明显提升，其浓度随着患者病情严重程度提升而增高。其中HBP和ADA对急性细菌性脑膜炎的病原体鉴别具有一定的意义。