【摘 要】
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目的构建大鼠IL-10真核表达载体并在大鼠软骨细胞中进行表达.方法将目的基因片段通过酶切连入真核表达载体pcDNA3,并以Super Fect Transfection Reagent介导转入大鼠软骨细胞
【机 构】
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上海第二医科大学上海市免疫学研究所
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)
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目的构建大鼠IL-10真核表达载体并在大鼠软骨细胞中进行表达.方法将目的基因片段通过酶切连入真核表达载体pcDNA3,并以Super Fect Transfection Reagent介导转入大鼠软骨细胞表达,RT-PCR检测细胞中mRNA水平,及ELISA检测细胞培养上清液中的IL-10蛋白含量.结果成功构建了大鼠IL-10真核表达载体,转入软骨细胞后,检测到细胞内IL-10mRNA转录,细胞培养24、48和72 h后,经ELISA检测上清液中IL-10蛋白含量分别为36、62和100 pg/mL.结论
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