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细叶桉是我国近年来成功引种的耐寒桉树种类之一，但其种源关系难以区分，不利于后续新品种的培育。为给后续的分子水平上鉴定细叶桉种源关系打基础，以细叶桉叶片基因组DNA为材料，分析了能够影响细叶桉ISSR—PCR的主要参数如模板DNA、引物浓度、dNTPs、Mg^2＋浓度、TaqDNA聚合酶用量、退火温度等6个因素对扩增结果的影响情况，建立了适用于细叶桉ISSR—PCR的反应体系和扩增条件。