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【摘 要】样品采集是动物疫病监测和诊断工作顺利开展的前提和基础，样品的质量好坏决定着检测工作的成败，检测结果的准确性在一定程度上依赖于样品的代表性和质量。这篇文章从不同检测对象出发，阐述了不同的采样技术要点，使我们在今后的工作中能更清楚地知道如何才能正确地采集到高质量的检测样品。
【关键词】动物疫病；监测样品；采集技术
实验室监测在重大动物疫病的诊断和防控中发挥了重要作用，监测结果的准确性、有效性除受实验方法、实验设备、监测试剂、实验操作等因素影响外，送检样品的质量和数量的影响也很大。下面将动物疫病检测样品的规范化采集技术简述如下。
1 样品采集要遵循的一般原则
1.1 样品种类
根据不同疫病或检验目的，分别采集相应的组织、器官、分泌物、排泄物等；在无法估计发病群体的病因时，可进行全面的样品采集。
1.2 样品数量
在进行流行病学调查、抗体监测、动物群体健康评估或环境卫生检测时，样品数量应满足生物统计学的要求。
1.3 不可盲目解剖
凡发现患畜有急性死亡，怀疑是炭疽病时则不能随意剖检，而应采取局部皮肤或耳尖的血液涂片镜检，排除炭疽病后方可解剖采样。
1.4 采样时间
采死亡动物的病料要及时，以死亡后6h内最佳；对于感染传染病的则要在发病前期采样。
1.5 做好人身防护
严防人畜共患病的感染，做好环境消毒和病害肉尸的处理，防止环境污染和疫病的传播。
2 样品采集
2.1 血清学检测样品
2.1.1 数量
用一次性采血器或一次性注射器（5ml）从畜禽静脉抽取血液3ml左右，在注射器内留一定空间。
2.1.2 部位
猪从前腔静脉采血，牛、羊、马等动物从颈静脉或尾静脉采血，用量少时也可以从耳静脉抽取，家禽从翅静脉采血。
2.1.3 标注
在采血瓶上贴上标签，注明种类、地址、编号、日期等。
2.1.4 血清分离
将采血瓶倾斜45°放在室温下静置，待凝固后血清自然析出时吸出，或经离心分离后吸出血清，将其装入无菌瓶，在瓶上贴上标签。
2.1.5 送检
短时间内送检的血清要置于4℃左右的地方冷藏保存；如时间较长才送检，应将血清置-20℃下保存，注意不能反复冻融，否则会影响抗体的效价。
2.2 病理学检测样品
2.2.1 采样部位
在采集时应选择病变最典型、最明显的部位，连同病灶附近的健康组织一并采集。
2.2.2 送检
将样品立即浸泡在10倍组织块体积的10%福尔马林缓冲液内固定，冷藏送检。
2.2.3 样品规格
样品厚度不超过0.5cm，切成1～2㎝？大小的组织块（检查狂犬病的组织块要再大些）。
2.2.4 其他要求
病理学检验的组织样品必须保证新鲜，样品要有切面，切忌挤压、刮摸和用水洗；如做冷冻切片，则要将组织放在0～4℃容器中，并尽快送到实验室。
2.3 细菌学检测样品
做细菌检测的样品，以采集发病典型或刚刚死亡的整体动物送实验室为最好，如不方便则可按无菌采样方法采集组织样品。每个组织须单独放在密闭的新灭菌容器内或灭菌塑料袋内，贴上标签并做好外包装消毒，放入冷藏箱内立即送往实验室。注意采集的所有样品都不得加入任何物质。
2.4 病毒学检测样品
做病毒检测的组织样品，应在动物发病初期体温升高期间按无菌采样方法采集，一般以组织脏器、血液、粪便等样品为主，要密封、冷藏送检。若送检时间较长，则最好冻结后送检，也可将组织块浸泡在含有青霉素的、pH值为7.4的PBS液中（按1mlPBS液加入2000IU青霉素），置于冷藏箱内送检；若采集的是粪便棉拭子，则应立即放入按1mlPBS液加入1万IU青霉素的PBS液中，PBS液的量以刚好淹没样品为好；若采集的是血液样品，则必须是抗凝血，采血前在真空采血管内加入0.1%肝素，按血液与0.1%肝素为10∶1的比例加入，采样后将采血管颠倒几次使其充分混合。
3 样品采集的注意事项
3.1 要有典型性
采集样品时，要根据检测的目的和实验室监测方法的不同进行有针对性的采集，同时还应根据发病动物典型临床症状、病变、是否治疗和有无并发症等情况，选择未治疗、病变明显、兼顾并发症等准确个体采样。
3.2 要有适量性
不同监测方法所需样品量的差异较大，要根据检测项目确定采样的量，采集的样品个数要足够，同时每个样品的采集量要满足检测的需要量且有备份，以备必要的复检使用，从而保证检测样品的准确性。
3.3 要有适时性
由于监测对象和监测项目的不同，对采集样品有不同的时间要求，要根据实际情况确定采样时间。用于抗体监测的样品，应根据疫苗的免疫时间、疫苗种类和病种确定时间。做病原分离的样品，必须在病初发热期或症状典型时采样，对于病死的则要立即采样，以免贻误采样的最佳时间，从而影响监测结果。
3.4 要有无菌性
用于病原学和血清学监测的样品所用包装用具、容器和采集器械必须经过灭菌处理，且容器要密封不漏液体，采样必须按无菌操作，同时要做好个人防护。尸体剖检采样的，先采样后检查，以免人为污染样品，同时还可避免其他细菌和病菌的污染而干扰检测结果。
3.5 要有追溯性
样品编号和采样单必须一致，要具有唯一性和可追溯性，送检样品采样单上的资料是检验人员确定检测项目、目的、方法的重要依据，也是分析样品检测结果的重要参考资料，因此采样单填写的越详细越好。清楚的了解畜禽的品种、日龄、免疫情况等信息，就可以选定正确的检验项目，进而得到正确的检验结果。
作者简介：
田肖（1972—），女，陕西城固人，兽医师，主要从事动物疫情测报工作
【关键词】动物疫病；监测样品；采集技术
实验室监测在重大动物疫病的诊断和防控中发挥了重要作用，监测结果的准确性、有效性除受实验方法、实验设备、监测试剂、实验操作等因素影响外，送检样品的质量和数量的影响也很大。下面将动物疫病检测样品的规范化采集技术简述如下。
1 样品采集要遵循的一般原则
1.1 样品种类
根据不同疫病或检验目的，分别采集相应的组织、器官、分泌物、排泄物等；在无法估计发病群体的病因时，可进行全面的样品采集。
1.2 样品数量
在进行流行病学调查、抗体监测、动物群体健康评估或环境卫生检测时，样品数量应满足生物统计学的要求。
1.3 不可盲目解剖
凡发现患畜有急性死亡，怀疑是炭疽病时则不能随意剖检，而应采取局部皮肤或耳尖的血液涂片镜检，排除炭疽病后方可解剖采样。
1.4 采样时间
采死亡动物的病料要及时，以死亡后6h内最佳；对于感染传染病的则要在发病前期采样。
1.5 做好人身防护
严防人畜共患病的感染，做好环境消毒和病害肉尸的处理，防止环境污染和疫病的传播。
2 样品采集
2.1 血清学检测样品
2.1.1 数量
用一次性采血器或一次性注射器（5ml）从畜禽静脉抽取血液3ml左右，在注射器内留一定空间。
2.1.2 部位
猪从前腔静脉采血，牛、羊、马等动物从颈静脉或尾静脉采血，用量少时也可以从耳静脉抽取，家禽从翅静脉采血。
2.1.3 标注
在采血瓶上贴上标签，注明种类、地址、编号、日期等。
2.1.4 血清分离
将采血瓶倾斜45°放在室温下静置，待凝固后血清自然析出时吸出，或经离心分离后吸出血清，将其装入无菌瓶，在瓶上贴上标签。
2.1.5 送检
短时间内送检的血清要置于4℃左右的地方冷藏保存；如时间较长才送检，应将血清置-20℃下保存，注意不能反复冻融，否则会影响抗体的效价。
2.2 病理学检测样品
2.2.1 采样部位
在采集时应选择病变最典型、最明显的部位，连同病灶附近的健康组织一并采集。
2.2.2 送检
将样品立即浸泡在10倍组织块体积的10%福尔马林缓冲液内固定，冷藏送检。
2.2.3 样品规格
样品厚度不超过0.5cm，切成1～2㎝？大小的组织块（检查狂犬病的组织块要再大些）。
2.2.4 其他要求
病理学检验的组织样品必须保证新鲜，样品要有切面，切忌挤压、刮摸和用水洗；如做冷冻切片，则要将组织放在0～4℃容器中，并尽快送到实验室。
2.3 细菌学检测样品
做细菌检测的样品，以采集发病典型或刚刚死亡的整体动物送实验室为最好，如不方便则可按无菌采样方法采集组织样品。每个组织须单独放在密闭的新灭菌容器内或灭菌塑料袋内，贴上标签并做好外包装消毒，放入冷藏箱内立即送往实验室。注意采集的所有样品都不得加入任何物质。
2.4 病毒学检测样品
做病毒检测的组织样品，应在动物发病初期体温升高期间按无菌采样方法采集，一般以组织脏器、血液、粪便等样品为主，要密封、冷藏送检。若送检时间较长，则最好冻结后送检，也可将组织块浸泡在含有青霉素的、pH值为7.4的PBS液中（按1mlPBS液加入2000IU青霉素），置于冷藏箱内送检；若采集的是粪便棉拭子，则应立即放入按1mlPBS液加入1万IU青霉素的PBS液中，PBS液的量以刚好淹没样品为好；若采集的是血液样品，则必须是抗凝血，采血前在真空采血管内加入0.1%肝素，按血液与0.1%肝素为10∶1的比例加入，采样后将采血管颠倒几次使其充分混合。
3 样品采集的注意事项
3.1 要有典型性
采集样品时，要根据检测的目的和实验室监测方法的不同进行有针对性的采集，同时还应根据发病动物典型临床症状、病变、是否治疗和有无并发症等情况，选择未治疗、病变明显、兼顾并发症等准确个体采样。
3.2 要有适量性
不同监测方法所需样品量的差异较大，要根据检测项目确定采样的量，采集的样品个数要足够，同时每个样品的采集量要满足检测的需要量且有备份，以备必要的复检使用，从而保证检测样品的准确性。
3.3 要有适时性
由于监测对象和监测项目的不同，对采集样品有不同的时间要求，要根据实际情况确定采样时间。用于抗体监测的样品，应根据疫苗的免疫时间、疫苗种类和病种确定时间。做病原分离的样品，必须在病初发热期或症状典型时采样，对于病死的则要立即采样，以免贻误采样的最佳时间，从而影响监测结果。
3.4 要有无菌性
用于病原学和血清学监测的样品所用包装用具、容器和采集器械必须经过灭菌处理，且容器要密封不漏液体，采样必须按无菌操作，同时要做好个人防护。尸体剖检采样的，先采样后检查，以免人为污染样品，同时还可避免其他细菌和病菌的污染而干扰检测结果。
3.5 要有追溯性
样品编号和采样单必须一致，要具有唯一性和可追溯性，送检样品采样单上的资料是检验人员确定检测项目、目的、方法的重要依据，也是分析样品检测结果的重要参考资料，因此采样单填写的越详细越好。清楚的了解畜禽的品种、日龄、免疫情况等信息，就可以选定正确的检验项目，进而得到正确的检验结果。
作者简介：
田肖（1972—），女，陕西城固人，兽医师，主要从事动物疫情测报工作