论文部分内容阅读
目的:构建表达小鼠NR4A1基因的小分子干扰RNA(siRNA)重组腺病毒载体。方法:根据siRNA靶序列设计并合成2条互补的64bp寡核苷酸。pShuttle—H1穿梭质粒经BgtⅡ、HindⅢ双酶切后,与退火的寡核苷酸进行连接,构建穿梭质粒pSbuttle—H1-siRNA。PmeⅠ酶切pShuttle—H1-siRNA,然后分别将腺病毒骨架质粒pAdEasy—1和穿梭质粒pShuttle—H1-siRNA转化至BJ-5183感受态细菌中进行同源重组。PacⅠ酶切线性化重组质粒pAdEasy—H1-s