小鼠NR4A1基因小分子干扰RNA重组腺病毒载体的构建与鉴定

来源 :医学研究生学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiuwangyang
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目的:构建表达小鼠NR4A1基因的小分子干扰RNA(siRNA)重组腺病毒载体。方法:根据siRNA靶序列设计并合成2条互补的64bp寡核苷酸。pShuttle—H1穿梭质粒经BgtⅡ、HindⅢ双酶切后,与退火的寡核苷酸进行连接,构建穿梭质粒pSbuttle—H1-siRNA。PmeⅠ酶切pShuttle—H1-siRNA,然后分别将腺病毒骨架质粒pAdEasy—1和穿梭质粒pShuttle—H1-siRNA转化至BJ-5183感受态细菌中进行同源重组。PacⅠ酶切线性化重组质粒pAdEasy—H1-s
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