【摘 要】
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目的克隆结核分枝杆菌 (MTB)分泌蛋白ESAT6基因,并构建重组表达质粒.方法根据Genbank中ESAT6基因序列,针对其编码区合成引物,采用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv 基因组DNA中扩
【出 处】
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国外医学：临床生物化学与检验学分册
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目的克隆结核分枝杆菌 (MTB)分泌蛋白ESAT6基因,并构建重组表达质粒.方法根据Genbank中ESAT6基因序列,针对其编码区合成引物,采用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv 基因组DNA中扩增出ESAT6基因,并连接到T载体,然后定向克隆到原核表达质粒pGEX-4T-2,阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定.结果经双内切酶消化所切下的片段,大小与预计相符;测序结果证实基因序列正确,符合表达框架.结论成功构建了重组原核表达质粒pGEX-ESAT6.
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