【摘 要】
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目的 探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其DNA甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)诱导肝细胞凋亡中的作用.方法 将人源肝细胞分为3组,对照组用正常含血清培养液处理细胞,实验组用100μmol·L-1 Hcy的含药血清处理细胞,干预组用含100μmol·L-1 Hcy和10μmol·L-15-氮杂胞苷的含药血清处理细胞,均培养48 h.用细胞活力染色实验检测肝细胞活力,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-RCR)检测MMP-2 mRNA的表达水平,用巢式降落式甲基化特异性PCR检测MMP-2启动子区DNA甲基化
【机 构】
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宁夏医科大学 基础医学院,宁夏回族自治区银川750000;国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室,宁夏回族自治区银川750000;宁夏血管损伤与修复研究重点实验室,宁夏回族自治区银川750000
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目的 探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其DNA甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)诱导肝细胞凋亡中的作用.方法 将人源肝细胞分为3组,对照组用正常含血清培养液处理细胞,实验组用100μmol·L-1 Hcy的含药血清处理细胞,干预组用含100μmol·L-1 Hcy和10μmol·L-15-氮杂胞苷的含药血清处理细胞,均培养48 h.用细胞活力染色实验检测肝细胞活力,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-RCR)检测MMP-2 mRNA的表达水平,用巢式降落式甲基化特异性PCR检测MMP-2启动子区DNA甲基化水平改变.结果 实验组的凋亡细胞数(红色细胞数)增加.实验组和对照组的MMP-2 mRNA表达分别为1.07±0.05和0.90±0.02,实验组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).实验组、对照组和干预组的MMP-2 DNA甲基化水平分别为0.46±0.01,0.53±0.01和0.40±0.02,实验组与对照组的上述指标和干预组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 MMP-2 DNA甲基化能够抑制同型半胱氨酸诱导的肝细胞凋亡.
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