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目的 获得NF-κB p65亚基转录激活区域（transcription activation domain，TAD），构建真核表达载体并在内皮细胞中检测其表达。方法 培养人脐静脉内皮细胞，提取总RNA，经RT—PCR得到p65TAD基因片段，测序正确后插入带有绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP—N1，构建表达载体pEGFP—N1一p65TAD，然后转染内皮细胞，荧光显微镜下观察表达情况，同时用Western blot分析蛋白的表达。结果 有效地扩增了p65 TAD 783 bp的目的基因片段。酶切结果