【摘 要】
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辅酶B12(5’-脱氧腺苷钴胺素)是具有生物活性的天然有机金属化合物,作为新陈代谢以及DNA合成有关的一系列酶反应的天然辅因子,在生物体内的多种分子内重排反应及核苷酸还原反
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辅酶B12(5’-脱氧腺苷钴胺素)是具有生物活性的天然有机金属化合物,作为新陈代谢以及DNA合成有关的一系列酶反应的天然辅因子,在生物体内的多种分子内重排反应及核苷酸还原反应中起重要作用。其Co-C键均裂是酶催化反应的关键步骤,因而测定Co-C键离解能以及研究Co-C键均裂引起的咕啉环构象变化和影响Co-C键强度的因素,对进一步阐明辅酶B12在生物体内的功能和酶催化作用的机理具有重要意义。近十几年来,随着激光技术和微弱信号检测技术的发展,光声测量方法及在化学、物理、生物等诸多领域的应用得到了迅速的发展。激光诱导时间分辨光声量热法(laser-induced optoacoustic calorimetry,简称LIOAC;或time-resolved photoacoustic calorimetry,简称PAC)是在纳秒至微秒时间量级上直接定量检测激光诱导光化学反应及光生化反应过程中能量传递以及有关反应分子体积变化的新方法。本工作首次运用光声量热法研究辅酶B12及其模型化合物的光解反应,获得了有关热力学和动力学信息,为进一步理解辅酶B12的生物功能和酶反应机理提供新的数据。本工作在完善光声量热实验装置和建立新的数据分析方法的基础上,开展了以下几方面的工作:(1)光声量热法研究辅酶B12及其模型化合物的光解反应运用光声量热法研究10～30°C温度范围内辅酶B12在中性水溶液中和甲基钴胺素在酸性和中性水溶液中的光解反应,测定了其光解反应的焓变,即Co-C键离解能分别为129±17,163±21和176±23 kJ/mol,这些值和文献中用热分解动力学方法测得的值一致。其中base-off型甲基钴胺素
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