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本文对核桃根腐病的病原菌进行了鉴定,并研究了该病原菌对不同品种核桃叶部生理生化和根部元素含量的影响,分析了土壤元素含量与核桃根腐病发病程度的相关性,筛选出多种生防菌,并对各生防菌株在核桃根际土壤和根内定殖的效果及对病原菌生防效果进行了探索。主要获得以下研究结果:1.根腐病病原菌经过显微镜观察,形态学鉴定为腐皮镰刀菌Fusarium solani;经ITS序列与TEF-1α比对,分子生物学鉴定该病原菌为F.solani。结合形态学与分子生学的鉴定结果,最终确定核桃根腐病病原菌为腐皮镰刀菌F.solani。人工接种病原菌F.solani至不同品种核桃后发现,铁核桃发病时间早且最为严重,部分植株死亡,是病原菌F.solani的感病品种;绵阳早熟核桃、新疆2号核桃发病较轻,感病均在1、2级水平,为病原菌F.solni的抗病品种。2.病原菌F.solani对三个品种核桃叶部光合作用、叶绿素含量、MDA和可溶性糖含量的影响不同。接种病原菌后,铁核桃净光合速率和蒸腾速率的减幅明显,绵阳早熟核桃和新疆2号核桃的光合速率和蒸腾速率的变化较小。绵阳早熟核桃、新疆2号核桃在病原菌接种前后叶片叶绿素含量无明显变化,一至三年生铁核桃叶片叶绿素含量均比对照组降低,且显著低于其他两个品种。铁核桃叶片内的MDA和可溶性糖含量在接种病原菌后迅速下降,并在50天时达到最小值,绵阳早熟核桃和新疆2号核桃叶片MDA与可溶性糖的含量下降缓慢,与铁核桃叶片MDA与可溶性糖含量达显著性差异。3.F.solani对不同品种核桃防御酶系酶活性的影响不同。接种病原菌后,铁核桃、绵阳早熟核桃和新疆2号核桃叶片SOD活性先上升下降,且绵阳早熟核桃仍保持在较高SOD活性,而新疆2号核桃SOD活性在接种40天时达到第二个峰值。不同品种核桃的POD活性变化趋势大致相同,均保持上升趋势,绵阳早熟核桃和新疆2号核桃上升趋势显著。接种病原菌后三个核桃品种的PPO活性都呈现先上升后下降的趋势,铁核桃较绵阳早熟核桃和新疆2号核桃出现峰值的时间晚。接种病原菌后核桃叶片中CAT活性的变化没有明显规律且品种间无显著差异。4.F.solani影响三个核桃品种根部元素的含量。病原菌接种后绵阳早熟核桃和新疆2号核桃根部有机质含量升高,而铁核桃根系有机质含量出现先升高后快速降低的变化;三个核桃品种根系全N、P、K含量均减少,且铁核桃降低水平更显著;绵阳早熟核桃和新疆2号核桃根系全Ca与Mg的含量在病原菌接种后略有升高,而铁核桃根系中Ca含量呈显著上升趋势。5.分析不同品种核桃叶部生理生化指标、根部元素含量与发病指数的相关性结果表明,可溶性糖、丙二醛、有机质、Ca和Mg的含量均与感病时间、品种抗病性和发病指数有极显著的相关性;4种防御酶的酶活性与植株抗病性呈极显著正相关关系,而与发病指数呈显著或极显著负相关,仅POD与时间存在显著正相关关系,而CAT与时间、品种抗性、发病指数均无显著相关性;在根部测定的各项指标中,有机质、N、P、K含量均与植株的抗病性均存在显著正相关,而与发病指数呈显著或极显著负相关;另外,发病指数与时间呈极显著正相关,与品种间抗性为显著负相关,Ca、Mg含量与发病时间和品种间抗性的相关性相反。6.对不同样地核桃根际土壤元素含量与根腐病相关性分析结果表明,根际土壤有机质、N、P、K、Mn、Zn的含量与根腐病感病级数呈现显著相关性;根际土壤的Ca、Al含量与根腐病感病级数无显著相关性。通过野外调查发现,核桃根腐病的发生种植地点的海拔、坡向、坡度以及土壤pH无显著相关性。7.通过初筛和复筛的拮抗试验发现,鉴定的两种生防菌真菌(ZJ-1)和细菌(XJ-1)及绛红褐链霉菌YSSPG3对F.solani抑菌率达到了 80%以上。经形态学鉴定和分子学鉴定相结合的方法,鉴定真菌(ZJ-1)为Trametesversicolor,细菌(XJ-1)为Bacillus amyloliquefaciens。通过生防试验发现,这三种生防菌对核桃根腐病有较好的防治作用,提前预防效果更佳。8.运用实时荧光定量PCR技术检测生防菌在核桃根际及根内中的定殖结果表明,施入B.amyloliquefaciens、S.purpeofuscus和 T.versicolor 60 天后,铁核桃根际土壤中F.solani的相对含量极显著低于对照组;施入B.amyloliquefaciens比施入S.purpeofuscus和T.versicolor的根际土壤中F.solani 的相对含量降幅更大,生防效果:B.amyloliquefaciens>S.purpeofuscus>T.versicolor;定殖稳定后,感病与健康植株根际土壤中B.amyloliquefaciens和S.Purpeofuscus的相对含量均与对照组无显著差异(P>0.05),而健康植株根际土壤中T.Versicolor的含量约是感病植株的2.6倍,定殖能力:B.amyloliquefaciens>S.purpeofuscus>T.versicolor;内生生防菌 B.amyloliquefaciens按照核桃根部直径大小依次定殖,定殖效果良好,并伴随迁移。