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目的:通过研究解毒祛瘀滋阴方对ODN刺激后RAW264.7小鼠单核巨噬细胞TLR9信号通路异常活化的的影响,探讨解毒祛瘀滋阴方在治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)时是通过调控Toll样受体9(toll like receptor9, TLR9)信号通路来减少糖皮质激素(glucocorticoids, GC)的用量从而起到增效减毒的作用。方法:将体外RAW264.7小鼠单核巨噬细胞置于6孔培养板中,随机将细胞分为四组,分别为①空白血清组:900μl高糖DMEM培养液+100μl空白血清;②寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucletide, ODN)刺激组:900μl高糖DMEM培养液+100μ l空白血清+ODN(加入后的ODN的终浓度为0.5μ M);③ODN+地塞米松组:900μl高糖DMEM培养液+100μl空白血清+ODN(加入后的ODN的终浓度为0.5μ M)+地塞米松(加入后的地塞米松的终浓度为40ng/ml);④ODN+含药血清组:900μl高糖DMEM培养液+ODN(加入后的ODN的终浓度为0.5μ M)+100μl含药血清。RT-PCR检测24h后RAW264.7小鼠单核巨噬细胞TLR9、髓样分化因子88(MyD88)、和核因子(NF)-кB、干扰素(IFN)-α、IFN-β mRNA的表达;Western blot检测24h后RAW264.7小鼠单核巨噬细胞TLR9、NF-к B蛋白的表达。结果:刺激24h后,RAW264.7细胞TLR9、MyD88、NF-кB、IFN-α、IFN-β mRNA表达,与空白血清组比较,ODN刺激组的TLR9、MyD88、NF-кB、IFN-α、IFN-β的值均有所升高,其差异具有统计学意义(P<0.05);与ODN刺激组比较,ODN+地塞米松组TLR9的值有一定程度的下降,但差异无统计学意义(P>0.05),MyD88、NFк-B、IFN-α的值均有所下降,其差异具有统计学意义(P<0.05),IFN-β的值明显低于ODN刺激组,差异具有统计学意义(P<0.01);与ODN刺激组比较,ODN+含药血清组TLR9、MyD88、NF-кB、IFN-α的值均有所下降,其差异具有统计学意义(P<0.05),IFN-β的值有一定程度的下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。RAW264.7细胞TLR9、NF-кB蛋白的表达,与空白血清组比较,ODN刺激组的TLR9、NF-кB的值均有所升高,其差异具有统计学意义(P<0.01);与ODN刺激组比较,ODN+地塞米松组TLR9的值有一定程度的下降,但差异无统计学意义(P>0.05),NF-кB的值有所下降,其差异具有统计学意义(P<0.01);与ODN刺激组比较,ODN+含药血清组TLR9、NFк-B的值均有所下降,其差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:第一,解毒祛瘀滋阴方可以抑制ODN刺激后RAW264.7单核巨噬细胞异常活化的TLR9信号通路中TLR9、MyD88、NF-кB、IFN-α、IFN-βmRNA和TLR9、MyD88蛋白的表达。第二,解毒祛瘀滋阴方在治疗SLE时可能是通过调控TLR9信号通路来减少GC的用量并起到增效减毒的作用。