基于NF-κB和TGF-β1/Smads信号通路探讨益肺散结法调节COPD气道重塑机理的研究

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目的:基于COPD气道重塑“气虚、血瘀、痰阻”的中医病机,本研究选用云南省名中医李庆生教授临床治疗COPD的经验方——玉屏风散加味方及其中的“涤痰”、“逐瘀”药物组,初步探讨该方及其药物组缓解气道炎症,干预气道重塑发展的作用机理,阐明益肺散结法调节COPD气道重塑的作用机制,为COPD的中医治疗提供实验依据和理论参考。方法:通过对大鼠进行烟熏和气管内注入脂多糖,复制COPD气道重塑大鼠模型,分别给予玉屏风散加味方及其中的“涤痰”、“逐瘀”药物组进行干预,HE染色观察大鼠肺组织形态结构变化,免疫组织化学和Western-blot检测大鼠肺组织中NF-κB、Smad2/3和Smad7的表达水平,RT-PCR检测大鼠肺组织中TGF-β1的m RNA相对表达水平,观察大鼠在不同给药时期细胞因子的变化水平。结果:1.大鼠肺组织HE染色的病理结果中药干预组同模型组比较,大鼠肺间隔增宽,细支气管上皮增生,部分脱落、坏死,管腔狭窄,管壁增厚,大量纤维组织增生,炎性细胞浸润,肺大泡等病理改变有所减轻,以成模后4周给药组全方高减轻最为明显。2.大鼠肺组织NF-κB、TGF-β1m RNA、Smad2/3、Smad7的表达变化NF-κB、Smad2/3、Smad7主要在细支气管壁及其周围炎性细胞浆内表达。模型组大鼠NF-κB、Smad2/3阳性表达增强,Smad7阳性表达减弱,药物干预组NF-κB、Smad2/3阳性表达减弱,Smad7阳性表达增强。预防给药组、成模后给药组、成模后4周给药组模型组大鼠TGF-β1的m RNA相对表达水平上调,成模后8周给药组模型组Smad7表达水平下调,差异显著(P<0.05)。与模型组比较,成模后给药组全方高、中,涤痰中,成模后4周给药组全方组,涤痰组,逐瘀中、低组TGF-β1的m RNA相对表达水平下调,成模后8周给药组全方高,涤痰高、中,逐瘀高、中组Smad7的表达水平上调,差异显著(P<0.05)。全方高在成模后给药组下调NF-κB的表达显著,涤痰中在成模后8周给药组下调NF-κB的表达显著(P<0.05)。高、中剂量组在成模后给药组下调TGF-β1的m RNA相对表达以全方组显著,中药干预组在成模后8周给药组下调TGF-β1的m RNA相对表达显著(P<0.05)。逐瘀高、中组在成模后8周给药组下调Smad2/3的表达显著(P<0.05)。结论:1.益肺散结法通过益气涤痰逐瘀作用调控NF-κB和TGF-β1/Smads信号通路,是该法调节COPD气道重塑的作用机制之一。2.玉屏风散加味方及其“涤痰”、“逐瘀”药物组能够降低肺组织NF-κB表达,抑制NF-κB信号通路活性,缓解气道炎症;通过下调TGF-β1的表达,降低Smad2/3的表达水平,上调Smad7的表达水平,干预气道重塑。
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