【摘 要】
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背景:正常的输卵管上皮纤毛摆动频率(Fallopian tubal cilia beat frequency,CBF)和肌肉蠕动功能对于受精卵的运输十分重要。其功能异常会导致输卵管妊娠(Tubal pregnancy,TP
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背景:正常的输卵管上皮纤毛摆动频率(Fallopian tubal cilia beat frequency,CBF)和肌肉蠕动功能对于受精卵的运输十分重要。其功能异常会导致输卵管妊娠(Tubal pregnancy,TP)或不孕。我们团队前期的流行病学研究发现,在使用左炔诺孕酮紧急避孕失败后,其患TP的风险较未服用者大大增加。进一步研究发现孕酮能降低CBF,并具有浓度依赖性。既往有文献报道,孕酮能抑制输卵管平滑肌自发性收缩,但其机制研究甚少。本研究选择一类较新的孕酮膜受体即孕激素膜受体组分1(Progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)作为切入点,探究其在孕酮抑制输卵管平滑肌自发性收缩中的作用,并对其机制做初步的探索,旨在为孕酮导致TP提供新的预防思路。目的:本研究利用多学科技术探讨以下四个方面的科学问题。(1)孕酮对人输卵管平滑肌自发性收缩的影响。(2)PGRMC1、小电导钙激活钾离子通道3(Small-conductance calcium-activated K~+,SK3)在人输卵管平滑肌中的表达、并分析对照组与病例组表达量的差异。(3)PGRMC1和SK3在孕酮抑制输卵管平滑肌自发性收缩中的作用。(4)血小板源性生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptorα,PDGFRα)(+)细胞是否存在于人输卵管平滑肌中;其是否表达SK3和PGRMC1。方法:临床收取因未绝经妇女因子宫肌瘤切除的输卵管组织和因宫外孕切除的输卵管组织。通过q PCR、Western Blot、免疫荧光和免疫组化明确PGRMC1和SK3在人输卵管平滑肌中的表达和定位。通过肌条实验探究孕酮对人输卵管平滑肌自发性收缩的影响以及PGRMC1和SK3在此过程中的作用。结果:本研究得到了以下创新性结果。(1)PGRMC1、SK3在人输卵管平滑肌中均有表达;在对照组,壶腹部与伞部PGRMC1的表达量高于间质部,而SK3的表达在各部位无差异;在病例组,各部位之间PGRMC1或SK3的表达均未见差异;但对照组壶腹部的PGRMC1表达明显高于病例组同部位;对照组的峡部、壶腹部、伞端的SK3表达明显高于病例组。(2)病例组输卵管平滑肌基础收缩幅度显著小于对照组。(3)孕酮能抑制人输卵管平滑肌的自发性收缩幅度,且随着浓度增加而减小;分别使用PGRMC1的拮抗剂(AG-205)或SK3的拮抗剂(Apamin)或非选择性钙离子激活钾通道拮抗剂(TEA)能一定程度地抵消孕酮对对照组平滑肌收缩幅度的抑制作用。应用TEA能部分抵消孕酮对病例组平滑肌收缩幅度的抑制作用(4)PDGFRα(+)细胞存在于人输卵管平滑肌中,并可能共表达SK3和PGRMC1。结论:孕酮能快递地抑制人输卵管平滑肌自发性收缩幅度,并呈浓度依赖性。PGRMC1、SK3存在与人输卵管平滑肌中,且可能共表达在PDGFRα(+)细胞上。SK3可能参与基础状态下输卵管平滑肌收缩活动。孕酮可能部分通过PGRMC1激活SK3参与抑制输卵管平滑肌收缩的过程。SK3在TP患者输卵管平滑肌中低表达可能会影响输卵管节律性蠕动,而增加紧张性收缩从而阻碍受精卵的运输。
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