【摘 要】
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该试验构建了植物表达载体pBI-th,并将其转入根癌农杆菌LBA中,然后通过农杆菌的介导将thaumatin基因导入烟草中,并对转基因植株进行了检测,借以初步探讨甜蛋白在植物中的转化
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该试验构建了植物表达载体pBI<,121>-th,并将其转入根癌农杆菌LBA<,4404>中,然后通过农杆菌的介导将thaumatin基因导入烟草中,并对转基因植株进行了检测,借以初步探讨甜蛋白在植物中的转化和表达情况,为其今后在更多的植物上应用提供依据.实验结果如下：1.甜蛋白thaumatin基因植物表达质粒pBI<,121>-th的构建与鉴定;利用DNA重组技术,将植物甜蛋白thaumatin基因克隆至植物表达载体pBI<,121>中,通过酶切、电泳,鉴定thaumatin基因已成功构建到植物表达质粒pBI<,121>中.2.pBI<,121>-th通过直接转化法导入农杆菌LBA<,4404>中,卡那霉素（Km）平板筛选阳性克隆,有单菌落生长,证明重组质粒已转进农杆菌LBA<,4404>中.3.植株再生体系的建立;采用无菌苗烟草叶片为外植体,以MS为基本培养基,筛选出MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.3mg/L以诱导不定芽的分化.4.转化体筛选及植株再生;5.转基因PCR检测.PCR扩增nptⅡ基因,证明thaumatin基因已导入烟草中,转化率为31.3﹪.
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