陕西省林木病原真菌区系及炭疽菌和木霉的系统发育研究

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本文对陕西省林木病原真菌资源进行了调查,在此基础上对陕西省林木病原真菌区系进行了分析,并通过rDNA-ITS序列分析了58株林木炭疽菌和19株木霉的系统发育,通过平皿拮抗试验、挥发性代谢物和非挥发性代谢物对炭疽菌菌落的影响,筛选优良的木霉抗性菌株。得出以下主要结果:1.陕西省林木病原真菌资源从陕西省的36个县(市、区)58种林木上采集病害标本865份,鉴定出林木病原真菌30属103种(变种)284株,其中子囊菌门9属,26种,98株,接合菌门2属3种6株,担子菌门8属11种21株,无性态真菌11属63种159株。对其中249株真菌进行了ITS-rDNA序列测定,提交NCBI-GenBank全部获取了接收序列号。2.陕西省林木病原真菌区系根据林木病原真菌在一定地理区域的种属组成结构,优势种属及特有种属的种类,将陕西省林木病原真菌区系划分为陕北黄土高原区,关中平原区和陕南秦巴山区3个区系。陕北黄土高原区病原真菌种类相对单一、数量较少,优势种有杨烂皮壳蕉孢菌和杨树细盾等;关中平原区病原真菌种类少,但危害性强的病原真菌较多,如小穴壳菌,胶孢炭疽菌和多主葡萄座腔菌;陕南秦巴山区病原真菌种类多样,而且特殊种类较多,如尤地木层孔菌、茶轮斑拟盘多毛孢等。3.炭疽菌属种间系统进化关系对58株林木炭疽菌在基于形态特征鉴定的基础上,结合GenBank上公布的11个相关序列,应用rDNA-ITS序列分析,研究了其遗传多样性和系统发育。结果表明,陕西省林木炭疽菌存在丰富的遗传多样性,序列多样性指数为0.165,株间平均遗传距离为0.134。将供试菌株分为4个遗传群,胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz)与其他林木炭疽菌一起分属在G1、G2、G3、G4群中,但同个别菌株间遗传分化明显,来自同一寄主上的木本炭疽菌存在明显的遗传差异,以寄主来定名炭疽菌种名值得商榷。应适当保留不同的种名,并以遗传型来替代胶孢炭疽菌种内的划分。4.木霉属rDNA-ITS序列分析对19株木霉进行了rDNA-ITS序列分析,结果表明,19株木霉分属8个种。菌株间平均遗传距离为0.0433,序列多样性指数为0.043,在92%的自展率下,将供试菌株分为3个遗传群,与经典的木霉分组情况基本吻合,进一步验证和明确了争议菌株T.harzianum的分组情况,rDNA-ITS序列分析所反映的亲缘关系,有助于疑难种分类地位的确定和近似种的区分。5.木霉优良抗性菌株的筛选应用19株木霉分别与炭疽菌进行了平皿拮抗试验、挥发性代谢物对炭疽菌菌落的影响和非挥发性代谢物对炭疽菌菌丝干重的影响,结果表明19株木霉菌对炭疽菌均有抑制作用,但各菌株的抑菌效果存在显著差异(P<0.001),不同菌株拮抗作用的主要机制有所不同,如菌株T01在3组实验中对炭疽菌均有抑制作用:在平皿拮抗实验中抑菌率为33.93%,在挥发性代谢物试验中抑菌率为78.45%,在挥发性代谢物试验中抑菌率为35.78%,表明木霉菌的拮抗作用是多机制共同作用的结果,其中T69、T01、NW673、NW702、NW227、T50等菌株对炭疽菌的生防能力较强。
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