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第一部分 神经干细胞的分离培养、鉴定及标记 目的 神经干细胞(NSC)的研究已逐渐成为国内、外基础及临床医学各专业的重要研究课题。NSC是一种成体干细胞，存在于胚胎和成年哺乳动物中枢神经系统的多个区域，属多能干细胞，在一定的微环境中具有自我更新和向神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞分化的能力，且具有极强的可塑性，利用NSC进行细胞治疗或基因治疗有很好的临床应用前景。豚鼠在耳科学基础研究中具有独特的优势，并得到广大耳科学研究者的广泛应用，建立一种简便、可行的豚鼠NSC培养方法将为NSC在耳科学领域研究的深入开展提供细胞支持，但目前关于豚鼠NSC的培养方法介绍的并不多。本实验旨在建立一种较为简便、可靠的豚鼠NSC分离、培养、标记方法，为耳科学领域NSC的进一步深入研究提供帮助。 材料与方法 分离新生豚鼠海马组织进行NSC的原代、传代培养及诱导分化培养，倒置显微镜下观察培养细胞的形态特征，培养的细胞行Nestin免疫细胞化学，Western Biot检测，对诱导细胞行NSE、GFAP免疫荧光化学观察，以鉴定所培养的细胞为NSC；用荧光染料DAPI标记干细胞，计算原代及传代标记率。 结果 1．原代培养见细胞呈大小不一、悬浮生长的细胞团，边界清晰，细胞团中细胞排列较为致密。光镜下传代培养的细胞形态特点与原代培养无明显差异。2．原代及传代培养的细胞团Nestin阳性表达，诱导分化后的细胞NSE、GFAP阳性表达。3．经荧光染料DAPI标记后，标记成功率可达93.4％，经传代8次后荧