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花生是世界范围内重要油料和经济作物之一,为充分发挥花生在盐碱地增值、增产和增效的优势,挖掘花生耐盐基因成为花生分子育种工作的关键。ABI4（Abscisic acid-insensitive 4）和DREB1（Dehydration responsive element binding protein）作为植物转录因子研究的热点,在调控与逆境诱导相关基因的表达、参与植物对盐胁迫的响应及适应过程中发挥关键作用。本研究以花生栽培品种丰花2号为材料,克隆了AhABI4基因并进行生物信息学分析,探究AhABI4基因的组织特异性和盐胁迫下的表达模式。构建病毒诱导的AhABI4基因沉默表达载体,利用农杆菌介导法转化花生,对沉默植株的耐盐性进行分析。同时以转AhDREB1基因花生T2代植株为材料,通过检测高盐胁迫下的植株表型、AhDREB1基因表达量、SOD和POD活性、MDA和可溶性蛋白含量等生理性状的变化来鉴定基因功能。主要研究结果如下:1.采用同源克隆方法获得栽培品种丰花2号的AhABI4–A和AhABI4-B的cDNA全长序列。AhABI4–A的c DNA全长是1753 bp,其CDS长1092 bp,编码363个氨基酸;AhABI4-B的c DNA全长是1807 bp,其CDS长1074 bp,编码357个氨基酸;AhABI4属于AP2/EREBP类转录因子家族的DREB-A3亚族成员,无跨膜结构域、无内含子。2.AhABI4基因在花生萌发种子、幼苗根、茎、叶中均表达,其中在萌发的种子中表达量最高,在幼苗茎中表达相对较低。AhABI4基因在花生幼苗期植株主根、侧根和功能叶中的盐胁迫应答模式均为诱导上调模式。在耐盐性强的山花11号萌发种子中AhABI4基因的转录水平降低,推测AhABI4基因负调控花生对盐胁迫的耐受性。3.构建了病毒诱导的AhABI4基因沉默表达载体TRV2-AhABI4,通过农杆菌介导的抽真空浸润法转化花生,得到AhABI4基因沉默效率高达59%的沉默植株。4.对AhABI4基因沉默植株进行盐胁迫处理,发现沉默植株萎蔫、失绿程度明显比野生型轻,复水后沉默植株能正常生长且复活率明显高于野生型;沉默植株的耐盐系数显著高于野生型,耐盐系数增幅18.9-21.7%。表明AhABI4负调控花生幼苗期的耐受性。5.对课题组前期获得的转AhDREB1基因花生T2代植株在苗期进行171mM的NaCl胁迫处理。结果显示:转基因植株叶片保绿程度及根系生长状况显著高于对照。转基因植株AhDREB1基因表达量升高、响应盐胁迫速度比对照快。转基因植株参与盐胁迫响应的SOD、POD酶活性和可溶性蛋白含量高于对照,MDA含量低于对照,说明AhDREB1基因超表达能够有效提高转基因植株对盐胁迫的耐受性。筛选到耐盐性较好的4个T2转基因单株,分别是D254、D380、D385、D448。