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目的：(1)建立高自发转移的乳腺癌动物模型。(2)观察PA-MSHA对乳腺癌小鼠局部成瘤及肺转移瘤形成的作用并探讨PA-MSHA对乳腺癌小鼠外周血中Treg细胞的影响。方法：从40只同系基因型BALB/c小鼠中随机选取32只构建动物模型。采用细胞悬液注射成瘤法,将4T1细胞皮下种植于小鼠的右上肢腹股沟处(注射前局部备皮),第7天全部成瘤。将32只荷瘤小鼠随机分为A、B、C、D四组并编号。当天给予以下处理：A组为未治疗组,给予生理盐水0.3ml瘤周皮下注射；B组给予环磷酰胺(cyclophosphamide, CTX) 0. lml (20mg/kg)腹腔注射；C组给予PA-MSHA(pseudomonas aeruginosa-mannose sensitive hemagglu-tinin,铜绿假单胞菌注射液)0.3ml瘤周皮下注射；D组给予CTX0. 1ml (20mg/kg)腹腔注射和PA-MSHA 0.3ml瘤周皮下注射。隔天治疗一次,共5次。剩余8只健康BALB/c小鼠不做任何处理,作为正常对照组E,同条件饲养。每天观察肿瘤体积变化,至实验第17天。第17天,每组随机选取4只小鼠取眼眶静脉血lml,行实时流式细胞检测小鼠外周血中Treg细胞(regulative T);小鼠死后,取瘤体、肺脏、脾脏,记录瘤重、计算脾指数；观察肺脏转移情况；观察荷瘤组剩余小鼠的生存期。运用SPSS13.0统计软件包对小鼠的肿瘤体积、瘤重、转移率、生存期、脾指数、Treg细胞等数据进行统计学分析。结果：(1)32只BALB/c小鼠经局部注射4T1细胞悬液,第7天全部成瘤,成瘤率为100%。其中,肿瘤体积最小值为21.10mm3,最大值为22.63mmm3。随机分组后,比较各荷瘤组小鼠肿瘤体积平均值,无明显统计学差异(P=O.999)。(2)给予不同处理后,各荷瘤组小鼠肿瘤的平均体积依次为：未治疗组495.60mm3、CTX组293.87mmm3、PA-MSHA组346.68mm3、CTX+PA-MSHA组216.71mm3。PA-MSHA组瘤体小于未治疗组(P<0.001),大于CTX+PA-MSHA组(P<0.05),与CTX组比较无统计学差异(P=0.160)。不同处理后,瘤重最小值为0.15g,最大值为0.93g。各组小鼠平均瘤重依次为：未治疗组0.78g、CTX组0.47g、PA-MSHA组0.51g、CTX+PA-MSHA组0.26g。PA-MSHA组瘤重小于未治疗组(P<0.01)、大于CTX+PA-MSHA组(P<0.01),与CTX组比较无明显差异(P=0.508)。(3)给予不同处理后,各荷瘤组小鼠的肺脏转移情况依次为：未治疗组4/4,CTX组1/4,PA-MSHA组2/4,CTX+PA-MSHA组0/4。CTX+PA-MSHA组明显低于未治疗组(P=0.014)。PA-MSHA组与其它各荷瘤组比较,肺脏转移率均无统计学差异(P>0.05)。(4)给予不同处理后,各荷瘤组小鼠的中位生存期依次为：未治疗组21.0天,CTX组36.5天,PA-MSHA组29.5天,CTX+PA-MSHA组46.5天。PA-MSHA组大于未治疗组(P<0.05),低于CTX+PA-MSHA组(P<0.01),与CTX组比较无统计学差异(P=0.056)。(5)各组小鼠脾指数平均值依次为：正常对照组4.44mg/g,未治疗组9.62mg/g,CTX组14.67mg/g,PA-MSHA组16.89mg/g,CTX+PA-MSHA组27.57mg/g。PA-MSHA组大于未治疗组(P=0.000),低于CTX+PA-MSHA组(P=0.000),与CTX组比较无统计学差异(P=0.352)。(6)Treg细胞在外周血CD4+淋巴细胞中所占比例在各组小鼠中的均值依次为：正常对照组4.20%,未治疗组5.83%,CTX组4.95%,PA-MSHA组4.92%,CTX+PA-MSHA组4.73%。正常对照组低于其它四组(P值均小于0.05),PA-MSHA组低于未治疗组(P=0.000),高于正常对照组(P=0.001),与CTX组、CTX+PA-MSHA组无统计学差异(P=0.847,0.304)。经Pearson相关分析,该比例与乳腺癌小鼠的生存期呈负相关(r=-0.618,P=0.011)。结论：1.PA-MSHA瘤周皮下注射时,可抑制乳腺癌小鼠瘤体生长,延长生存期,与低剂量的环磷酰胺联合应用时,疗效更佳。2.在4T1细胞株建立的高自发转移乳腺癌小鼠模型体内,Treg细胞在外周血CD4+淋巴细胞中的比例增高,且为乳腺癌小鼠预后的负性因子,PA-MSHA对该比例的增高有抑制作用。