毛细管液相色谱检测食品中十种生物胺的研究

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生物胺是普遍存在于动物、植物和发酵食物中的一类含氮的低分子量的有机化合物,但高含量的生物胺会引起头痛、反胃、血压升高、心悸、肾脏受损等不良反应。因此建立一种高准确度和高灵敏度的方法来检测生物胺的含量具有重要意义。实验优化了生物胺柱前衍生条件、毛细管液相色谱分离条件、香烟过滤嘴作为固相萃取吸附材料的固相萃取(SPE)净化条件和从食品基质中提取十种生物胺的条件,并将固相萃取技术与毛细管液相色谱检测技术相结合建立生物胺的检测方法。研究表明:香烟过滤嘴纤维对生物胺衍生产物有着较好的吸附作用。通过单因素变量试验,优化了影响SPE萃取效率的主要参数,最终确定的最优SPE操作条件如下:上样溶液的pH为7,淋洗液为丙酮:水(1:9,v/v)混合溶液,洗脱剂为乙酸乙酯:甲醇(2:8,v/v)混合溶液,洗脱体积为6mL;实验进一步优化了十种生物胺的毛细管液相色谱分离条件,使用ZORBAX XDB-C18(150×0.5mm,3.5μm)色谱柱,在10.0μL/min的流速下,以水(A)和乙腈(B)作为流动相梯度洗脱,进样体积为1μL,柱温为35℃,所有分析物峰形对称且基线分离,十种生物胺在0.01-40mg/L的范围内具有良好的线性(r2>0.999),仪器的检出限(LOD)在0.001-0.03mg/L之间。将建立的方法用于肉制品和水产品(猪肉、牛肉、鳕鱼和鱿鱼)中生物胺的检测,方法的检出限在0.002-0.05mg/L之间,在加标浓度为0.5mg/kg.1mg/kg(g.5mg/kg时,十种生物胺的回收率在71.30-128.27%之间,相对标准偏差(RSDs)在1.95-20.13%范围内,说明建立的方法可以用于复杂的生物样品中十种生物胺的准确定量。
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