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猪繁殖与呼吸障碍综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）引起,以母猪流产、死胎、木乃伊胎和仔猪呼吸道症状为主要特征,对我国及世界范围内的养猪业造成巨大的损失。中国大陆自1996年首次分离到PRRSV后,不断有新型PRRSV的报道,经过20多年的演化,PRRSV基因多样性变得十分复杂。2017年,我国首次报道NADC34-like PRRSV,该类毒株在美国是主要的PRRSV流行毒株,对美国养猪业造成了巨大的打击。推测我国该类毒株是从美国输入的。这将进一步增加我国PRRSV的复杂性,并对国内现有PRRSV的防控提出挑战。为了解我国NADC34-like PRRSV的流行情况和演化特点,本研究在2018～2019年从全国16个省、市和自治区的发病猪场采集疑似PRRSV阳性样品650份,共检测到6株NADC34-like PRRSV,其中HLJZD22-1812、HLJDZD32-1901、HLJZD30-1902、LNDZD10-1806获得全基因组序列,HNLCL82-1811、HNLCL58-1812仅能完成Nsp2区域的测序。结合国内最早报道的LNWK96和LNWK130及2017年后我国提交NCBI的NADC34-like PRRSV共12个毒株进行遗传演化分析,结果表明我国大多数NADC34-like PRRSV属于sublineage1.5,Nsp2推导氨基酸序列比对结果表明这类毒株存在100aa的缺失,重组分析表明重组片段与美国毒株同源性更高。由于近3年来NADC34-like PRRSV在我国检测到的数量和分布区域均有所增加,且该类毒株有多处特征与我国早期出现的NADC30-like PRRSV相似,推测NADC34-like PRRSV可能成为我国潜在的流行毒株。美国相关报道表明NADC34-like PRRSV能够引起大量母猪流产,但对仔猪致病性差异较大,而我国仅有关于造成母猪流产的相似报道,对仔猪致病性的研究尚未开展,因此分离病毒,进行致病性研究具有重要意义。本研究从PAM细胞上成功分离NADC34-like PRRSV HLJDZD32-1901,采用间接免疫荧光的方法在原代PAM细胞上测定HLJDZD32-1901的滴度为1×104TCID50/mL。选取7头5周龄SPF仔猪,随机分为2组,第1组为攻毒组（n=5）,每头仔猪按照1×104 TCID50/mL（2 mL滴鼻+2 mL肌注）进行攻毒,第2组为对照组（n=2）,采用相同方式注射等量的1640培养液。动物试验每天测温,观察临床症状发现攻毒组出现咳嗽、厌食等相对明显的症状,攻毒后0、3、5、7、10和14 d检测ELISA抗体及血清中的病毒载量。攻毒后0、7和14 d进行体重测量。攻毒后14 d剖杀全部试验猪只,观察各脏器病理变化,制备病理切片并测定病毒载量。动物试验结果表明HLJDZD32-1901能够引起轻度临床症状,所有试验猪只没有发烧,但8～14 d体重增长缓慢,与对照组形成差异显著,攻毒组猪只病毒血症在攻毒后3 d开始出现,7 d达到峰值（约3×106copy/mL）,攻毒组部分猪只在攻毒后7 d抗体检测转阳,10 d全部转阳,对照组全程未检测到PRRSV病毒载量,抗体始终保持阴性,与SD53-1603（NADC30-like PRRSV）相比,HLJDZD32-1901引起的病毒血症及猪只抗体转阳时间相对延后,病毒血症峰值更低;病毒载量最高的组织脏器依次是肺脏、淋巴结和扁桃体;剖解结果表明,肺脏有明显出血点和实质性病变;组织病理观察表明攻毒组有明显间质性肺炎。上述结果表明,HLJDZD32-1901能够引起典型PRRSV感染特征,对仔猪具有温和致病性。本研究表明NADC34-like PRRSV可能成为我国潜在的流行毒株该,且我国该类毒株的代表株HLJDZD32-1901能够引起典型PRRSV感染特征,对仔猪具有温和致病性。上述结果为我国防控NADC34-like PRRSV的进一步传播及疫苗研发奠定了基础。