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近年来,随着人口老龄化问题的日趋严重,老年疾病(如阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD))的发生率也日渐增多,给家庭和社会带来了很大的负担,因此延缓衰老、提高老年人生活质量成为当前研究关注的热点。越来越多的抗衰老药物被研究和发现并应用于临床治疗,其中包括单味中药和中药复方制剂,但中药复方制剂经过一定程度的抗衰老药理学研究者却屈指可数。滋肾益肝方作为一复方制剂,包括多味中药,文献研究发现其可能具有较强的抗衰老作用,所以本文通过体内外实验研究了滋肾益肝方的抗衰作用及其机制。目的观察滋肾益肝丸方体内外抗衰老和抗氧化作用,并探讨其机制。方法1动物体内实验研究滋肾益肝方的抗衰老作用及机制：选ICR小鼠,随机分成六组：正常对照组、衰老模型组、维生素E组、滋肾益肝方低、中、高(5、10、20g生药材·Kg·-1d·-1)组。除正常组外,其他各组按150mg·Kg-1·d-1的剂量皮下注射D-半乳糖致衰老模型,同时给后四组灌胃维生素E,低、中、高剂量的滋肾益肝方药液。六周后,用Morris水迷宫法测定各组小鼠的逃避潜伏期和穿越原平台的次数来检测其学习记忆能力；之后眼球取血,断颈法处死小鼠,分别测定小鼠的胸腺指数和脾脏指数,血浆SOD活性和NO含量,肝脏中SOD、GSH-Px活性和MDA的水平以及脑组织中SOD活性和MDA的水平。结果1与正常组比较,模型组的逃避潜伏期由31.1±11.6s延长至45.4±13.9s(P<0.05),穿越原平台的次数由3±2.0降低至1±1.0(P<0.01)；胸腺指数和脾脏指数分别由0.1227±0.04降低至0.0683±0.01及0.2312±0.02至0.1942±0.02(P<0.01)；血浆、肝脏、脑组织中SOD活性分别由69.57±6.6U/ml降低至60.43±4.7U/ml (P<0.05);29.88±2.2U/mgprot降低至25.81±2.5U/mgprot (P<0.05)及45.62±5.0U/mgprot降低至35.45±4.8U/mgprot (P<0.01);肝脏、脑中的MDA含量则分别由3.62±0.8nmol/mgprot升至6.76±1.6nmol/mgprot及6.15±0.4nmol/mgprot升至7.54±0.4nmol/mgprot (P<0.01);血浆中NO的含量由62.10±3.4μmol/L升高至74.38±6.5μmol/L (P<0.01);肝中GSH-Px活性也由324.2±41.1U/mgprot降至218.7±27.6U/mgprot(P<0.01)。而与模型组比较,滋肾益肝方各给药组的逃避潜伏期缩短为20.6±8.7s、28.5±6.6s、14.0±9.0s (P<0.01),穿越原平台的次数增加到3±1.6、4±2.0、5±1.7(P<0.01)；胸腺指数和脾脏指数明显升高,分别为0.0983±0.03、0.116510.03、0.1213±0.03(P<0.01);0.2476±0.03(P<0.05)、0.2781±0.03(P<0.01)、0.2319±0.02(P<0.01);血浆、肝脏、脑组织中SOD活性分别增加为83.42±7.0U/ml (P<0.01)、81.55±8.0U/ml (P<0.01)、67.01±9.0U/ml;33.35±3.0U/mgprot(P<0.01).31.66±2.7U/mgprot(P<0.01)、29.12±3.5U/mgprot (P<0.05);54.83±4.6U/mgprot、53.32±3.8U/mgprot、48.48±5.9U/mgprot (P<0.01);肝脏、脑中的MDA含量则显著下降,分别为4.02±0.8nmol/mgprot、4.50±1.0nmol/mgprot、4.02±0.7nmol/mgprot(P<0.01);5.64±0.7nmol/mgprot、5.76±0.5nmol/mgprot、4.87±0.7nmol/mgprot(P<0.01);血浆中NO的含量明显降低为61.79±5.1μmol/L (P<0.01)、66.99±11.2μmol/L、60.08±5.0μmol/L (P<0.01);肝中GSH-Px活性也显著提高到307.9±67.2U/mgprot、315.0±60.2U/mgprot、299.1±70.9U/mgprot (P<0.01)。方法2体外实验：用MTT实验测定TSG和滋肾益肝方药液对H2O2诱导的PC12细胞氧化应激损伤的保护作用。实验分为正常组、H2O2组、H2O2+TSG(0.1、1、5、10、50μmol/L)组、H2O2+滋肾益肝方药液(0.16、0.4、0.8μmol/L)组。先用不同浓度的H202作用细胞,选出最佳作用浓度,根据结果选择300μmol/L作为H2O2的作用剂量。种96孔板,先用TSG和药液作用细胞24h,再加H2O2处理24h,加MTT,测定OD值,计算细胞存活率。结果2与正常组比较,H2O2处理细胞后,使细胞存活率由100±8.11%降低至85±5.02%(P<0.01)；用TSG和药液预处理过的PC12细胞再经H2O2作用,其存活率分别为90.10±5.72%、90.78±9.23%、101.27±9.82%、108.80±3.69%、109.63±13.72%;102.85±8.17%、106.27±9.19%、101.52±10.91%,后六组差异有显著性(P<0.01)。结论滋肾益肝方的体内外抗衰老抗氧化研究表明滋肾益肝丸能延缓D-半乳糖致ICR小鼠的衰老,提高衰老小鼠的学习记忆能力和免疫功能,其机制可能是通过滋肾益肝方清除机体内的自由基和提高机体自身的抗氧化系统活性,减缓D-半乳糖对机体的氧化应激损伤,从而起到延缓衰老的作用。