【摘 要】
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本论文对流式细胞法分离波尔山羊X、Y精子进行了初步研究，实验包括3部分，精子的染色，Percoll梯度的优选及精子流式细胞法的分离。 实验一、用荧光染料Hoechst33342处理对波尔
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本论文对流式细胞法分离波尔山羊X、Y精子进行了初步研究，实验包括3部分，精子的染色，Percoll梯度的优选及精子流式细胞法的分离。 实验一、用荧光染料Hoechst33342处理对波尔山羊精子质量的影响。 实验共分一个对照组和四个实验组，精子在荧光染料浓度分别为实验组Ⅰ5.0mg/l，Ⅱ7.5mg/l、Ⅲ10mg/l、Ⅳ12.5mg/l的各处理中孵育60min。精子活率、死活精子比率和顶体完整率方面，实验组Ⅰ、Ⅱ与对照组比较差异不显著(p＞0.05)，实验组Ⅲ、Ⅳ与对照组比较差异显著(p＜0.05)；测定精子存活时间实验中，实验组全部与对照组比较差异显著(p＜0.05)；因此，染色液浓度大于7.5mg/l时，对精子损伤较大。 实验二、双层Percoll密度梯度离心对波尔山羊精子优选效果分析。 通过45％-90％双层Pcrcoll密度梯度离心优选染色后精子，顶体完整率(61.6％±14.5％和84.6％±12.4％；P＜0.01和低渗肿胀率(64.3％±8.4％和86.2％±7.1％；P＜0.01)与染色后精液比较均有极显著差异。梯度离心明显优选出了质量较好精子，因此，可以应用在流式细胞分析的精子预处理过程。 实验三、流式细胞法分离波尔山羊X、Y精子。成功使用流式细胞仪筛选出了X和Y精子，速度超过1，000/s，得出了较为理想的结果。
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