论文部分内容阅读
目的通过观察电热针三阴交对POI模型大鼠血清激素及卵巢组织GDF9表达的影响,探讨三阴交穴位的特异性功能及电热针三阴交对POI模型大鼠卵巢功能的影响,为三阴交穴在POI的临床应用中提供更科学依据。方法筛选40只具有规律动情周期的SPF级雌性SD大鼠,随机分成空白组10只和造模组30只。空白组以0.9%生理盐水进行灌胃,造模组以50mg/kg雷公藤多苷片混悬液进行灌胃,两组均一日一次,连续灌胃14天。将造模成功的24只大鼠按随机原则分成模型组、电热针非经非穴组和电热针三阴交组,每组8只（n=8）,空白组8只。于造模结束次日开始进行电热针干预,电热针三阴交组取三阴交穴,连接电热针仪,频率为2Hz,连续波,每次20min,一日一次,连续干预14天,在干预结束前7天开始,连续进行7天的阴道脱落细胞涂片。电热针非经非穴组取非经非穴,余操作同电热针三阴交组。空白组和模型组分别给予相同时间的抓取、固定及阴道脱落细胞涂片,不进行任何治疗。干预结束后统一按动情间期进行取材,分别称量并记录各组大鼠体重和卵巢湿重;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠血清中的促卵泡生成素（FSH）、雌二醇（E2）和抑制素B（INHB）的含量;免疫组化法和实时荧光定量PCR检测各组大鼠卵巢组织GDF9的表达;HE染色观察各组大鼠卵巢组织形态变化。结果1、卵巢脏器指数:与空白组比较,模型组、电热针非经非穴组和电热针三阴交组卵巢脏器指数均明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.001,P＜0.001,P＜0.01）。与模型组比较,电热针非经非穴组卵巢脏器指数有增高趋势,差异无统计学意义（P＞0.05）;电热针三阴交组卵巢脏器指数明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与电热针非经非穴组比较,电热针三阴交组卵巢脏器指数明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。2、血清性激素水平:（1）FSH:与空白组比较,模型组、电热针非经非穴组和电热针三阴交组血清FSH含量均明显升高,差异具有统计学意义（均P＜0.001）。与模型组比较,电热针非经非穴组血清FSH有降低趋势,差异无统计学意义（P＞0.05）;电热针三阴交组血清FSH含量明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.001）。与电热针非经非穴组比较,电热针三阴交组血清FSH含量明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.001）。（2）E2:与空白组比较,模型组、电热针非经非穴组和电热针三阴交组血清E2含量均明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.001,P＜0.001,P＜0.05）。与模型组比较,电热针非经非穴组血清E2含量有增高趋势,差异无统计学意义（P＞0.05）;电热针三阴交组血清E2含量明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.001）。与电热针非经非穴组比较,电热针三阴交组血清E2含量明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.001）。3、血清INHB激素水平:与空白组比较,模型组、电热针非经非穴组和电热针三阴交组血清INHB含量均明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.001,P＜0.001,P＜0.05）。与模型组比较,电热针非经非穴组血清INHB含量有增高趋势,差异无统计学意义（P＞0.05）;电热针三阴交组血清INHB含量明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.001）。与电热针非经非穴组比较,电热针三阴交组血清INHB含量明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.001）。4、卵巢组织形态变化:光学显微镜下可见,空白组大鼠卵巢形态饱满,各级卵泡发育正常,闭锁卵泡数量较少。模型组卵巢体积减小,不同发育阶段卵泡及黄体数量均减少,闭锁卵泡数量明显增多。电热针非经非穴组卵巢体积与模型组无明显差异,各级生长卵泡及黄体数量减少,闭锁卵泡数量增多。电热针三阴交组卵巢体积增大,各级卵泡发育良好,生长卵泡及黄体数量增多,闭锁卵泡数量减少。5、卵巢GDF9相对表达量:与空白组比较,模型组和电热针非经非穴组卵巢GDF9蛋白及m RNA相对表达量均明显降低,差异具有统计学意义（均P＜0.001）;电热针三阴交组卵巢GDF9蛋白相对表达量降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与模型组比较,电热针非经非穴组卵巢GDF9蛋白及m RNA相对表达量有增高趋势,差异无统计学意义（P＞0.05）;电热针三阴交组卵巢GDF9蛋白及m RNA相对表达量明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.001）。与电热针非经非穴组比较,电热针三阴交组卵巢GDF9蛋白及m RNA表相对达量明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.001,P＜0.01）。结论1、电热针三阴交对POI模型大鼠有一定的调节作用,能够增加POI模型大鼠卵巢脏器指数,改善卵巢组织形态结构。2、电热针三阴交可以降低血清FSH,升高E2和INHB含量,上调卵巢GDF9的表达,改善卵泡发育情况,调节卵巢功能。3、电热针三阴交穴对POI模型大鼠的调节作用明显优于电热针非经非穴,表明三阴交穴对卵巢功能的调节具有特异性。