熊果酸对膀胱癌5637细胞凋亡的作用及对Survivin蛋白表达的影响

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目的观察熊果酸对高危浅表性膀胱癌5637细胞株的体外作用,包括对细胞增殖和诱导凋亡的作用,以及对Survivin基因表达的影响。为熊果酸用于膀胱癌治疗提供依据。方法体外常规培养5637细胞,取对数生长期细胞随机分为两组。实验组加入质量浓度为10、20、40、80ug/ml的熊果酸分别处理24h、48h;对照组不加熊果酸,并设立阴性对照组。采用MTT法检测各组细胞增殖抑制率;光镜观察凋亡细胞;流式细胞仪检测凋亡率;western-bolt法检测Survivin蛋白表达。结果MTT结果表明10~80 ug/ml熊果酸可有效抑制5637细胞增殖,抑制作用呈时间-剂量依赖性,80 ug/ml作用48h组的抑制率为47.64±1.39%(P<0.05);光镜可见细胞体积变小、核固缩、胞质出现空泡、包膜皱缩和凋亡小体形成;流式细胞仪检测发现,实验组细胞出现凋亡,且凋亡率随着药物浓度和作用时间增加而增加,80 ug/ml作用48h组凋亡率45.20±1.12%(P<0.05);Western-blot结果表明熊果酸可下调Survivin蛋白表达水平,且随药物浓度和作用时间增高而下降(P<0.05)。结论熊果酸对膀胱癌5637细胞有明显的抑制增殖的作用,并对其有诱导凋亡的作用。其机制可能是下调Survivin蛋白表达,诱导细胞凋亡来实现的。熊果酸可能成为膀胱癌治疗的新临床用药。
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