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对GenBank中报道的CAV和CPV的序列分别进行同源性比较分析，选择CAV的保守序列E3区和CPV的保守序列NS1区作为扩增区域。利用DNAsis软件设计筛选出合适的两对联合PCR引物，一对为CAV-1和CAV-2通用引物，扩增CAV-1片段为513bp，扩增CAV-2片段为1023bp，另一对引物扩增CPV，扩增片段为719bp。建立各自的单项PCR，并用琼脂糖凝胶电泳和限制性内切酶酶切鉴定PCR产物（Xba Ⅰ鉴定CPV产物，Apa Ⅰ鉴定CAV-1产物，Nhe Ⅰ鉴定CAV-2产物），结果证明为相应病毒的特异核酸片段。在单项PCR的基础上，优化MgCl2浓度和循环次数等反应条件。用已知TCID50的细胞培养物检测联合PCR方法的敏感性，结果表明，该反应对CAV-1的敏感性是细胞培养测得的TCID50的31.6倍，对CAV-2敏感性是细胞培养测得的TCID50的10倍，对CPV敏感性是细胞培养测得的TCID50的1.26倍。初步应用于15份细胞培养物、5份CAV-1人工感染犬、1份CAV-2人工感染犬和3份CPV人工感染犬以及30份临床病料的检测，结果与病毒分离方法一致，比HA／HI和电镜负染方法检出率高，可用于临床和实验室诊断。 根据GenBank中发表的CAV-1强、弱毒0.80-0.91map unit之间的保守序列间大小不同，按照引物设计的原则，设计合成了一对通用引物，扩增CAV-1强毒569bp的片段，扩增CAV-1弱毒244bp的片段。对PCR产物分别进行电泳、酶切和测序，证明PCR产物片段大小、酶切位点和核苷酸序列与GenBank中发表的已知序列完全一致，正常DK细胞上清和CAV-2强、弱毒株细胞培养物均不能被该引物扩增，说明该引物具有良好的特异性。该PCR对CAV-1强毒的敏感性是细胞培养测得的TCID50的31.6倍，对CAV-1弱毒敏感性是细胞培养测得的TCID50的15.8倍。可用于CAV-1强、弱毒株的鉴定和CAV-1感染的诊断。 病料中特别是在粪便中常常存在某些抑制PCR的物质，使反应结果呈假阴性。为了提高PCR反应的检出率，根据SPA能吸附某些哺乳动物血清中IgG的Fc段而不影响其与特异性抗原结合的特性，用犬抗CAV-CPV血清致敏的SPA菌作为免疫吸附剂，提纯病料中的CAV和（或）CPV，再进行PCR。对致敏条件进行优选，确定了血清与SPA菌比例为1:9；致敏时间为30min；探讨了血清效价对致敏效果的影响；对致敏的SPA菌与病料作用时间进行优选，建立了用致敏的SPA菌作为固相免疫吸附剂提纯病料中CAV和（或）CPV的方法。用3.5M MgCl2与致敏SPA菌-病毒复合物室温感作30min，离心取上清为含病毒的洗脱液。分别取洗脱液和取吸附了病毒的免疫吸附剂作为PCR底物进行PCR检测，结果表明吸附了病毒的免疫吸附剂更适合作为PCR底物。将金黄色葡萄球菌固相免疫吸附剂提纯CAV和CPV再进行PCR的方法，应用于临床诊断，检测病料中的CAV和（或）CPV。己知阳性的8份病料，直接进行PCR反应结果为阴性，经过金黄色葡萄球菌兔疫吸附剂提纯后PCR结果为阳性。结果证明，金黄色葡萄球菌相免疫吸附剂提纯CAV和CPV方法可有效除去对PCR反应产生抑制的物质，能够提高检出率。