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目的:研究重症急性胰腺炎(SAP)早期小鼠肠道微皱褶细胞(M细胞)的变化,探讨大黄附子汤干预对M细胞的影响,揭示其保护SAP肠道免疫屏障的机制,为大黄附子汤临床防治SAP奠定理论基础。方法:选取30-35g健康8周龄的SPF级C57BL/6J雄性小鼠40只,随机分为4组:空白对照组(10只)、大黄附子汤对照组(10只)、SAP组(10只)、大黄附子汤治疗组(10只),异氟烷气体麻醉,实验组以3.5g/kg剂量腹腔注射20%左旋精氨酸,对照组腹腔注射等量生理盐水,空白对照组和SAP组分别于造模后12、24、36h给予生理盐水0.2ml灌肠,大黄附子汤对照组和治疗组分别于造模后12、24、36h给予大黄附子汤0.2ml灌肠。造模48h后取血清,ELISA法检测血清淀粉酶、内毒素、IL-1β及TNF-α含量;取回肠、胰腺、肺组织进行HE染色,胰腺组织用改良Schmidt评分标准、回肠组织用Chiu肠黏膜损伤评分标准、肺组织用Smith肠黏膜损伤评分标准分别行病理学评分;另取回肠进行免疫组化染色,检测M细胞特异性蛋白GP2的变化。结果:1、SAP组死亡3只,大黄附子汤治疗组死亡1只。对照组小鼠腹腔注射后一般情况好,饮水正常,活动自如。实验组小鼠腹腔注射后一般情况差,精神萎靡,饮水减少,反应迟钝,行动迟缓,呼吸急促,拱背收腹。2、两对照组组间淀粉酶、内毒素、IL-1β及TNF-α水平无明显差异;与空白对照组相比,SAP组淀粉酶、内毒素、IL-1β及TNF-α水平明显升高;与SAP组相比,大黄附子汤治疗组血清淀粉酶、内毒素、IL-1β及TNF-α水平显著下降。3、大体观察及HE染色:肉眼观,对照组胰腺、回肠、肺脏正常;SAP组可见胰腺、回肠、肺脏水肿淤血,局部坏死;而大黄附子汤治疗组胰腺、回肠、肺脏呈轻度损伤。镜下可见对照组胰腺、回肠、肺组织正常;SAP组胰腺、回肠、肺组织淤血坏死;大黄附子汤治疗组胰腺、回肠、肺组织轻度淤血坏死。与空白对照组相比,SAP组胰腺、回肠、肺组织病理学评分均显著增高(P<0.05);大黄附子汤治疗组与SAP组相比,胰腺、回肠、肺组织病理学评分显著降低(P<0.05)。4、M细胞特异性蛋白GP2免疫组化染色:大黄附子汤对照组与空白对照组相比较,GP2水平无明显差异;与空白对照组相比,SAP组GP2表达明显降低(P<0.05);相较于SAP组,大黄附子汤治疗组GP2的表达水平显著升高(P<0.05)。结论:1、20%L-精氨酸腹腔注射建立SAP小鼠模型成功。2、SAP发生后,肠M细胞转运蛋白GP2表达明显减少,提示作为免疫应答起始的M细胞损伤,肠道免疫应答不能正常启动,肠道免疫屏障受损。3、应用大黄附子汤治疗后,肠M细胞转运蛋白GP2表达明显增加,表明M细胞启动肠道免疫应答的功能恢复,肠道黏膜免疫功能增强,阻止肠道菌群及内毒素移位,减轻了SAP对全身的损伤;大黄附子汤对肠道功能恢复具有很好的促进作用。