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研究背景自Gaspaero Aselli第一次发现并描述了淋巴管到现在,人类对淋巴系统的研究已经进行了三百多年。淋巴系统作为人体体液循环的一个组成部分已经得到了广泛的认可。它对于维持正常的体液平衡起非常重要的作用。但是由于淋巴液无色透明,管壁薄、细小、脆弱,在正常情况下呈塌陷状态,很难在活体组织上看到,致使淋巴的研究受到了限制。传统的研究方法有淋巴管注射法,淋巴管造影法等。活体淋巴管显色法常用的色素剂为3%-11%Patent Blue V(PB)溶液,其毒性低微,吸收迅速,安全可靠,可从宏观到微观水平显示淋巴管的形态和结构,为基础和临床研究提供了有效的形态学资料。随着分子生物学、免疫组织化学等学科技术的迅猛发展,使淋巴系统的研究也得到了飞速发展。目前关于淋巴水肿和淋巴回流障碍的治疗仍是困扰医学界的重大难题之一,许多疾病的发病机制与人体组织和器官的淋巴回流息息相关,引起了越来越多的研究者的注意。研究表明体腔内的压力梯度变化是淋巴回流的主要动力,增加体腔的压力差,可以促进淋巴回流,是目前治疗淋巴回流障碍性疾病最好的方法。口腔负压治疗法是利用此原理,通过影响腔内的压力梯度,增加淋巴循环的动力,对淋巴水肿性疾病、慢性心脑血管供血不足和血管神经性头痛等治疗有显著的疗效。在应用口腔负压治疗以上疾病时,发现其可以改善部分眼患者的眼压情况,因此我们提出疑问,青光眼是否与淋巴系统有关系?青光眼是世界上主要的致盲眼病之一,眼内压升高是青光眼的主要致病因素,而降低眼内压是治疗青光眼,保护视功能最主要、最直接的方法。在绝大多数青光眼中,房水排出阻力过大是导致眼压升高的原因。因此房水流动的动力与房水循环的阻力是青光眼研究的一个重要问题。目前认为房水主要通过两个途径外流,一为传统的小梁网途径,另一个途径为脉络膜巩膜途径,也称非经典房水流出通道。自19世纪中期以来,有学者对眼淋巴的研究兴趣逐渐增加,但是由于研究方法和认识的局限,没有充分的证据使眼科界对淋巴的研究达成共识,这些研究对眼淋巴只有模糊的认识,或是认为眼没有淋巴,或是仅做简单的论述。虽然淋巴系统对于发挥和维持眼的正常功能具有重要的意义,但由于淋巴管结构细小,淋巴液与周围组织液颜色相近,难以观察鉴别,因此对于眼的淋巴研究却相当少,似乎根本就不存在。目前普遍认为眼的淋巴系统主要存在于结膜和泪腺组织中。到目前为止,眼前房尚未证实淋巴管的存在,但有实验提示眼前房和球后间隙与颈淋巴结之间存在“淋巴”引流。因此我们设计本实验,通过兔眼前房注射Patent Blue V(PB),应用解剖学方法,观察颈部淋巴显色情况和眼压的变化,探索前房与颈部淋巴是否存在引流关系,并观察口腔负压吸引对眼压的影响以及对前房与颈部淋巴引流的影响。以期证实前房与颈部淋巴之间存在引流关系,并为探索治疗青光眼的新方法提供依据。目的用解剖学方法探索前房与颈部淋巴是否存在引流关系,并观察口腔负压吸引对眼压的影响以及对前房与颈部淋巴引流的影响。方法健康新西兰大白兔26只,经裂隙灯、眼底、眼压检查无异常。随机分为2组：A组(正常组13只)不应用口腔负压；B组(口腔负压组13只)应用口腔负压。兔全麻后于左锁骨上颈总动脉部位,确定左静脉角的位置,沿颈静脉方向作一纵行皮肤切口,分离皮下组织暴露颈部淋巴干及颈部浅淋巴结。固定口腔负压装置。无菌操作下行左前房穿刺,抽取房水0.2ml后,向前房内注射10% Patent Blue V(PB)溶液0.2ml,注射完毕开始计时。开始注入染料的同时A组不给予口腔负压吸引,B组给予口腔负压吸引0.12mpa／min,每次15 min,14天为一个疗程。记录前房注入染料完毕到染料在颈淋巴干及颈部浅淋巴结刚刚出现染色的时间,即前房-颈淋巴显色时间。眼部观察指标：术中及术后观察结膜有无被Patent Blue染为蓝色的情况。每天用裂隙灯观察结膜、角膜、前房和晶体等眼前节的改变,每天同一时间由同一人应用压陷式眼压计测量眼压。统计学分析：实验数据应用SPSS10.0统计软件处理。结果以平均值±标准差(s)表示,统计学分析用两样本均数比较的t检验,P＜0.05为差异有统计学意义。用Microsoft Excel软件制作图表。结果1、眼部观察指标：术中及术后观察两组兔结膜皆无被Patent Blue染为蓝色的情况。术后第1天两组兔前房Patent Blue均代谢完毕,两组角膜和晶体清亮、结膜和前房无炎症表现,两组术后分别与术前比较及两组间比较均无统计学意义。2、眼压：对照组(A组)术前眼压范围在10-18.8mmHg,平均(16.0±1.8)mmHg,术后眼压范围在10-18mmHg,平均(14.5±2.0)mmHg,术前、术后眼压比较差别无统计学意义(P＞0.05)。实验组(B组)术前眼压范围在12-20mmHg,平均(16.1±2.1)mmHg,术后眼压范围在8-13mmHg,平均(10.6±2.5)mmHg,术前、术后眼压比较及与A组眼压比较差异有统计学意义(P＜0.05)。3、前房-颈淋巴显色时间：A组染料到达颈淋巴干及颈部浅淋巴结刚刚染色的时间为(34±2.6)min,B组染料到达颈淋巴干及颈部浅淋巴结刚刚染色的时间为(29±1.8)min,两组显色时间比较差别有统计学意义(P＜0.05)。结论：1、初步证实兔眼前房与颈部淋巴存在引流关系。2、建立口腔负压可以促进兔正常眼的淋巴循环,使房水流出速度加快,降低眼压。3、Patent Blue对眼内组织无毒性,对眼压无影响,可用于眼内的淋巴研究,安全可靠。4、初步证实前房的淋巴引流不是通过结膜淋巴管引流至颈部淋巴。