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非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)包括单纯性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)、脂肪性肝纤维化和脂肪性肝硬化。其中NASH是NAFLD进展的重要中间阶段,也是隐源性肝硬化的重要病因。NAFLD是一种病变主要在肝小叶,以肝细胞脂肪变性和脂肪过多贮积为病理特征但无过量饮酒史的临床综合征。NAFLD最常见病因为肥胖、2型糖尿病和高脂血症。NAFLD的患病率逐年上升,已成为全球普遍关注的医学问题和社会问题。NASH以窦周纤维化为特征,由活化的肝星状细胞介导。血管紧张素-Ⅱ(AngiotensinⅡ,ATⅡ)已被报导在组织器官纤维化的发生机制上起重要的作用,并且研究了它在器官纤维化中的作用。一些研究已证实AT1受体阻制剂(ARB)可明显改善实验性肝纤维化通过抑制肝星状细胞活化和肝脏TGF-β1的表达。最近,替米沙坦,一种新型的ARB,被发现除了阻制AT1受体外,它还是PPARγ的部分激动剂,具有改善糖脂代谢,阻止体重增加,促进脂肪细胞分化的作用。故我们探讨替米沙坦对NASH大鼠肝纤维化的影响,为NASH提供一种新的治疗方法。目的:建立非酒精性脂肪性肝炎模型,观察替米沙坦对NASH大鼠体重、血清转氨酶、血脂、胰岛素抵抗以及对肝脏病理、纤维化的影响。探讨替米沙坦防治NASH的作用机制。方法:选取雄性(Sprague Dawley)SD大鼠35只正常喂养1周后,随机分成3组:正常对照组(NC group, n=10)喂饲普通饲料16周;高脂对照组(FC group, n=15),喂饲高脂饲料(88%普通饲料+ 2%胆固醇+10%猪油)16周;高脂加替米沙坦干预组(FT group, n=10),喂饲高脂饲料。12周末时随机取FC组5只做肝组织的HE染色,确定造模成功。然后干预组给予替米沙坦干预(5mg/kg.d)并继续高脂饮食,而正常及模型对照组则以等容量盐水灌服,均每日一次,持续4周。实验动物自由饮水进食。16周后处死大鼠,电子天平称取体重,肝湿重,计算肝指数:肝湿重/体重×100%;取肝右叶约1cm×1cm×0.5cm组织固定于4%多聚甲醛,常规石蜡切片,Masson染色明确有无纤维化,HE染色光镜下观察组织脂肪变程度及炎症分级;测定血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)。测空腹血糖(FBG),空腹血清胰岛素(FINS),由公式HOMA-IR=(FPG×FINS)/22.5计算胰岛素抵抗指数。用免疫组织化学法测定各组肝组织中α-SMA的表达。用半定量的逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组大鼠肝脏TIMP-1、MMP-2和TGF-β1的mRNA表达水平。结果:1各组大鼠体重、肝湿重及肝指数的变化情况:16周末成功复制大鼠NASH模型。模型组大鼠的体重( 609.56±37.29 )、肝重( 25.40±4.71 )及肝指数( 4.29±0.49% )均明显高于正常对照组的体重(516.29±37.77)、肝重( 13.03±2.74 )及肝指数(2.72±0.57%)(P值均<0.01),有显著性差异。与模型组相比,治疗组体重(558.15±46.12)、肝重(18.19±2.73)及肝指数(3.79±0.57%)均明显降低(P<0.01,0.01,0.05),有统计学意义。2肝组织病理学:正常组大鼠肝细胞无脂肪变性,均无炎性细胞浸润;模型组大鼠出现弥漫性肝细胞脂肪变性,以中央静脉周围最为明显,可见程度不等的小叶内炎症、汇管区炎症,并有点灶状坏死,甚至部分坏死融合成片,与正常组相比有显著性差异(P值﹤0.01)。治疗组肝细胞脂肪变性较模型组明显改善(P<0.01);治疗组炎症分级较模型组明显降低(P﹤0.01)。造模组12周大鼠肝脏Masson染色未见肝组织纤维化,但造模组16周出现中央静脉周围、窦周纤维组织增生及纤维条索。治疗组肝脏Masson染色未见纤维化,有显著性差异(P<0.01)。3血清生化指标:(1)血清丙氨酸转氨酶(ALT)和门冬氨酸转氨酶(AST):模型组ALT (114.00±19.75)较正常组( 48.20±10.99)显著增高(P值﹤0.01),而治疗组ALT为(78.80±15.64 )较模型组显著下降(P值﹤0.01),但与正常组仍有差异(P值<0.01)。模型组AST为(265.33±52.16)较正常组(153.00±45.06)显著增高(P值﹤0.01),而治疗组AST为(211.83±65.51),较模型组下降,但无明显差异(P﹥0.05)。(2)血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C):模型组血清TC、TG分别为(2.65±0.77,0.53±0.27 )较正常组(1.44±0.24,0.29±0.14)显著升高( P﹤0.01,0.05 ),治疗组TC、TG分别为( 2.22±0.55,0.39±0.18)较模型组下降(P﹥0.05),但无明显差异;模型组HDL-C(0.30±0.09)较正常组(0.46±0.05)显著下降(P值﹤0.01),而治疗组HDL-C(0.31±0.11),较模型组有所上升,但无明显差异(P﹥0.05)。4胰岛素抵抗变化及血糖情况:模型组空腹血糖、胰岛素及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分别为(6.58±0.86,20.73±0.91,6.23±0.19)与正常对照组相比(4.58±1.00,10.48±1.46,2.13±0.29)明显升高(P值均<0.01),治疗组空腹血糖、胰岛素及胰岛素抵抗指数分别为(5.38±0.88,15.02±1.22,3.59±0.29)较模型组明显下降,有显著性差异(P值均<0.01)。5免疫组织化学法:正常组大鼠肝脏中α-SMA仅于血管壁平滑肌细胞胞浆少量表达,而模型组大鼠肝脏α-SMA表达除在血管壁平滑肌细胞胞浆外,在肝组织中也见有阳性表达,与正常组比较,有显著性差异(P<0.01)。治疗组表达较模型组明显减少(P<0.01),有统计学意义。6 TIMP-1,MMP-2和TGF-β1 mRNA表达:(1)TIMP-1mRNA变化:与正常组mRNA 0.32±0.03相比,模型组0.93±0.08显著增加( P﹤0.01 ),治疗组0.77±0.07明显低于模型组( P值﹤0.05 )。( 2 )MMP-2mRNA变化:正常组mRNA为0.47±0.05;与正常组相比,模型组0.88±0.09显著增加(P﹤0.01);治疗组0.69±0.07较模型组明显降低(P﹤0.01)。(3)TGF-β1 mRNA变化:与正常组mRNA 0.12±0.01相比,模型组0.36±0.04显著增加(P﹤0.01);治疗组0.26±0.03明显低于模型组(P值﹤0.01)。结论:高脂饲料饮食16周可成功诱导大鼠NASH形成。替米沙坦能改善糖脂代谢及胰岛素抵抗并降低体重,可减轻肝脏脂肪变性及抗肝纤维化作用。其分子机制可能与其激活PPARγ受体,抑制血管紧张素-Ⅱ1型受体有关。对NASH有一定的干预作用。