论文部分内容阅读
目的:CD4~+CD25~+调节性T细胞(Tregs)具有免疫抑制作用,可以抑制肿瘤免疫的形成,被认为是肿瘤免疫逃逸的重要机制之一,但其分化机制尚不清楚。胸腺基质淋巴生成素(TSLP)是一种新型的细胞因子,在胸腺中促进了Tregs的分化和发育,这种机制是否也存在于肿瘤状态下Tregs水平升高尚待研究。本研究通过检测胸腺基质淋巴生成素(TSLP)在乳腺癌组织、正常乳腺组织、转移淋巴结和未转移淋巴结中的表达,确定TSLP的相对表达量;检测调节T细胞在乳腺癌组织、正常乳腺组织、转移淋巴结和未转移淋巴结中阳性细胞比例,进而分析TSLP与调节T细胞在乳腺癌组织中的相关性。方法:收集50例乳腺癌患者的肿瘤组织、正常乳腺组织、转移和未转移淋巴结,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TSLP-mRNA的表达,采用免疫组化法检测Foxp3~+Tregs阳性细胞比例。最后通过t检验分析TSLP在乳腺癌肿瘤组织、正常乳腺组织及转移淋巴结和未转移淋巴结中的表达差异,分析TSLP在乳腺癌中的表达与患者的年龄、转移淋巴结数量、临床病理学类型及PR、ER、Her-2、组织学分级、肿瘤大小及临床TNM分期的相关性,并分析Tregs在上述组织中阳性细胞比例的差异,通过计算Pearson系数来分析乳腺癌组织中TSLP表达与Tregs阳性细胞比例之间的相关关系,并得出相关性结论。结果:半定量RT-PCR结果显示,TSLP-mRNA在乳腺癌组织、正常乳腺组织、转移淋巴结中和未转移淋巴结中表达的相对量分别为0.5278±0.1478,0.3941±0.1421,0.3078±0.1329,0.0000±0.0000,TSLP-mRNA在肿瘤组织中的表达量高于正常乳腺组织(P＜0.05),在转移淋巴结中的表达量高于未转移淋巴结(P＜0.05)。实时定量PCR结果显示,在上述组织中TSLP-mRNA的相对表达量分别为0.06369±0.04392,0.04689±0.03245,0.04180±0.02896,0.00434±0.00028,TSLP-mRNA在肿瘤组织中的表达量高于正常乳腺组织,差异具有统计学意义(P＜0.05);在转移淋巴结和未转移淋巴结中的表达差异具有统计学意义(P＜0.05)。TSLP-mRNA在乳腺癌肿瘤组织中的表达,与患者年龄、病理学类型、淋巴结转移个数、组织学分级以及HER-2、ER表达情况无显著性相关;其表达与临床分期(P＜0.05)、肿瘤大小(P＜0.05)及PR表达情况(P＜0.05)相关。免疫组织化学法检测结果显示,Foxp3~+Tregs阳性细胞比例在乳腺癌组织、正常乳腺组织、转移淋巴结和未转移淋巴结中的阳性细胞比例分别为(8.36±4.30)%、(0.58±0.40)%、(11.55±6.80)%、(2.81±1.57)%,Foxp3~+Tregs阳性细胞比例在乳腺癌组织中高于正常乳腺组织(P＜0.05),在转移淋巴结中高于未转移淋巴结(P＜0.05)。经统计学分析,乳腺癌中TSLP-mRNA的表达与Tregs阳性细胞比例呈正相关(r=0.544,P＜0.05);乳腺癌转移淋巴结中TSLP-mRNA的表达与Tregs阳性细胞比例呈正相关(r=0.363,P＜0.05)。结论:①在mRNA水平上证实了TSLP在乳腺癌肿瘤组织中表达量高于正常乳腺组织,在转移淋巴结中表达量高于未转移淋巴结;②Foxp3~+Tregs阳性细胞比例在乳腺癌组织中高于正常乳腺组织;在转移淋巴结中高于未转移淋巴结;③乳腺癌中TSLP的表达与Tregs阳性细胞比例呈正相关;乳腺癌转移淋巴结中TSLP的表达与Tregs阳性细胞比例呈正相关;④TSLP可能在乳腺癌Tregs分化中起到重要作用。