Ets-1在浆液性卵巢癌中的表达及意义

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yang20090907
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目的:卵巢癌是导致妇女死亡的三大生殖器肿瘤之一,发病机制尚不清楚,由于缺乏早期诊断手段,其死亡率居妇科恶性肿瘤首位,是严重威胁女性健康的生殖道恶性肿瘤。探讨E26转录因子-1(E26 transformation-specific-1,Ets-1)在浆液性卵巢癌组织中的表达及意义,分析Ets-1与浆液性卵巢癌患者临床病理资料之间的关系,为卵巢癌这种发病率高、恶性程度高、死亡例数高的妇科肿瘤的发病机制提供新的理论参考。  方法:收集2014年12月至2016年5月在中国医科大学附属盛京医院妇科住院手术的浆液性卵巢癌新鲜组织30例、石蜡组织40例,正常卵巢新鲜及石蜡组织各30例。两组间年龄比较差异无统计学意义。用荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测新鲜组织中Ets-1 mRNA在转录水平的表达情况,具体操作:提取组织RNA,经DNA消化酶Ⅰ处理纯化RNA,逆转录成cDNA,进行PCR反应,内参选用GAPDH;通过蛋白免疫印迹检测新鲜组织中蛋白表达情况,步骤为:提取组织蛋白质,配制10%的SDS-PAGE凝胶,电泳分离目的蛋白,转膜、脱脂牛奶封闭、Ets-1一抗孵育,4℃过夜,与相应二抗结合,发光,内参选用GAPDH;用免疫组织化学方法检测石蜡组织中Ets-1蛋白表达情况,具体为:连续切片、梯度脱蜡、枸橼酸钠抗原修复,S-P法顺序操作、抗体孵育,DAB显色、苏木素复染、梯度脱水及封片。最后分析Ets-1的表达与浆液性卵巢癌临床病理参数(FIGO分期、淋巴结、年龄、分级、CA125水平及腹水量)之间的关系。  结果:Ets-1蛋白在浆液性卵巢癌石蜡组织中的阳性表达率(75%)明显高于正常卵巢石蜡组织(13.3%),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。临床病理参数分析发现:Ets-1表达量与卵巢癌FIGO分期及淋巴结是否转移有关(P<0.05),与患者年龄、分级、CA125水平及腹水量均无明显统计学差异(P>0.05)。RT-PCR显示正常卵巢新鲜组织和浆液性卵巢癌新鲜组织中Ets-1 mRNA在转录水平相对表达量分别为1.549±0.252、0.644±0.091,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western-blot结果显示Ets-1蛋白相对表达分别为3.967±0.787、0.970±0.198,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。  结论:Ets-1在卵巢癌石蜡组织和新鲜组织中截然相反的两种表达水平可能与其不同作用机制有关,需要进一步研究,Ets-1可能参与卵巢癌的发生。
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