围植入期小鼠子宫内膜形态学变化及激活素A、抑制素α的表达和功能

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目的:研究Activin A和Inhibinα在小鼠子宫内膜表达的规律性变化及其对胚泡植入的影响,初步探讨它在小鼠胚胎着床过程中的作用。方法:以成年未经产雌性昆明种小鼠对研究对象,以动情期雌鼠分别于正常雄鼠和输精管结扎雄鼠2:1合笼,第二天清晨查到阴栓记为真(假)孕1d。分别在2~6d将真孕和假孕小鼠颈椎脱臼处死,剖腹取其子宫并取动情期非妊娠小鼠子宫作为对照,4%多聚甲醛固定,分别进行HE染色观察真孕和假孕小鼠子宫内膜的光镜变化;电镜观察真孕小鼠子宫内膜的超微结构改变;免疫组化SP法检测子宫内膜Activin A和Inhibinα的表达;计算机图像分析免疫组化染色结果;于孕4d上午9AM小鼠子宫角分别注射Activin A抗体和生理盐水,于孕8d观察着床胚泡数并与正常对照组进行比较,分析Activin A对胚泡植入的影响。结果:1. HE染色结果:真孕2~6d小鼠子宫内膜呈动态性变化趋势,其中以4~5d固有层中的腺体增多,内膜水肿,基质细胞肥大、间隙增宽,血管增生显著。2.透射电镜结果:真孕2~6d小鼠子宫内膜的腔上皮、腺上皮和基质细胞内的细胞器动情期较非妊娠时丰富,在4~5d子宫内膜的腔上皮和腺上皮内的线粒体、粗面内质网、分泌颗粒等丰富,基质细胞肥大,富含糖原、脂滴等。3.免疫组化结果:真孕2~6d,Activin A主要表达于子宫内膜的腔上皮、腺上皮和基质细胞胞质中,于4~5d表达最强;Inhibinα主要表达于子宫内膜的腔上皮和腺上皮胞质中,于4~5d表达最强,;假孕2~6d,Activin A和Inhibinα在子宫内膜的表达和真孕组明显不同。4.计算机图像分析系统计算Activin A和Inhibinα在真孕2~6d子宫内膜表达的平均光密度(MOD)值,经SPSS软件分析,两者在真孕2~6d子宫内膜的表达具有正相关性。5.于着床前的孕4d9AM子宫角注射Activin A抗体,于孕8d观察胚泡着床数,结果显示注射Activin A抗体后胚泡着床数明显减少,差异显著(P<0.05)。结论:1.真孕和假孕2~6d小鼠子宫内膜形态呈现动态变化趋势,在孕4-5d变化最为显著。2.真孕2~6d小鼠子宫内膜腔上皮、腺上皮和基质细胞中持续表达Activin A,提示Activin A可能在小鼠胚胎植入过程中发挥重要的作用。3.真孕2~6d小鼠子宫内膜腔上皮和腺上皮中持续表达Inhibinα,提示Inhibinα可能在小鼠胚胎植入过程中发挥重要的作用。4.假孕2~6d小鼠子宫内膜的表达规律和真孕组明显不同,提示Activin A和Inhibinα的表达不仅受母体激素的影响,也和胚胎植入有关。5. Activin A和Inhibinα在真孕2~6d小鼠子宫内膜的表达为正相关性,两者可能协同参与了胚胎植入的过程。6.用Activin A抗体在小鼠胚泡着床前的子宫角注射,发现胚泡着床数明显减少,推测Activin A可能在胚泡着床中扮演重要角色。
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