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C4光合作用是世界上许多粮食和能源作物的固定碳的基本模式,包括玉米,高粱,甘蔗,小米等。和C3植物相比,C4植物在将CO2运输进入到卡尔文循环之前,首先将CO2固定到一个C4化合物里面。狐尾草是禾本科的一种。二倍体C4植物、植株矮小、生长周期较短、易于自交、基因组小,大约510 Mb,目前基因组序列正在测序,它的这些属性极大的方便了C4光合研究。狐尾草是NADP-ME亚型C4光合作用的代表,它将发展成为C4光合代谢研究的模式植物。我们探索了影响狐尾草愈伤再生体系的条件,并在此基础上进行了农杆菌介导的遗传转化实验。从人工气候室收获狐尾草种子,去掉外层颖片,然后进行消毒。成熟的种子被切成两半,接种在诱导培养基上(MS + 2.5 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L KT + 800 mg/L casein + 0.5g/L pro + 5 mg/L AgNO3 ),用封口膜封好后放在黑暗环境下,28℃培养3-4周时间,成熟种子能够产生四种类型的愈伤组织,选取颜色发白,略微发黄,质地结实的胚性愈伤进行继代培养﹙MS + 1.75 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L KT + 800 mg/L casein + 0.5g/L pro+5 mg/L AgNO3﹚。胚性愈伤每两周继代一次,经过6周,胚性愈伤大量扩繁。愈伤组织转移到再生培养基(MS + 800mg/L casein + 0.5g/L pro +1.5mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.5 mg/L NAA)之后,在16小时光照/8小时黑暗环境下,进行再生培养,愈伤逐渐长出再生芽。以成熟种子为外植体进行愈伤组织诱导培养,为狐尾草的快速扩繁提供了很好的方法。同时,我们进行了农杆菌介导的狐尾草转基因实验。以继代2到4次、颜色鲜亮、硬质颗粒状的胚性愈伤为转化受体材料,利用农杆菌菌株LBA4404(pcambia 1301)进行转化,愈伤组织在添加乙酰丁香酮和铺有滤纸的共培养基上与农杆菌共培养,3天后转移到含400mg/L的羧苄青霉素的恢复培养基上进行恢复培养,之后在含25mg/L的潮霉素和200mg/L的羧苄青霉素的筛选培养基上培养6-7周,筛选出新的抗性愈伤组织再进行分化培养,最后成功获得抗性植株5棵,并进行了PCR检测。