顺铂影响骨肉瘤143B细胞Notch信号通路的实验研究

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目的:研究不同浓度顺铂对骨肉瘤143B细胞Notch通路的影响。方法:不同浓度DDP(顺铂)(2μM、4 μM、6μM、8μM、10μM)处理不同时间(1d、2 d、3d、4d、5d))后,CCK-8 法测定不同浓度(2 μM、4μM、6μM、8μM、10μM)DDP对OS(骨肉瘤)细胞增殖抑制率的影响;用低浓度(2μM、3μM、4μM)DDP和高浓度(6 μM)DDP处理OS细胞后,qRT-PCR定量分析Notch目的基因Hes1、Hes5、Hey1、Hey2、HeyL的相对表达量;Western blot检测低浓度(2μM、3μM、4μM)DDP和高浓度(6 μM)顺铂处理OS细胞后Hes1与Hey1的表达水平;免疫荧光半定量分析低浓度(2μM、3μM、4μM)DDP处理后,OS的Notch目的基因的相对表达量。结果:DDP给药后143B细胞增殖受抑制,尤其是当浓度大于4μM时;qRT-PCR、Western blot及免疫荧光结果显示当DDP浓度较低时(≤4 μM),Notch信号通路激活,而浓度较高时(≥6 μM)时则受抑制。结论:DDP对OS的Notch信号通路的影响具有剂量依赖性和时间依赖性,且必须在处理48 h后才能发挥其效应。
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