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目的:通过多种分离纯化方法得到沙枣多糖均一组分,研究均一组分的相对分子质量、单糖组成、糖苷键构型及其免疫活性。方法:1.依次采用DM-18型大孔树脂、DEAE-52纤维素柱层析、葡聚糖G-100柱层析、透析纯化,最终得到了沙枣多糖组分。采用紫外-可见分光光度法、TOYOPEARL HW-55F凝胶色谱法、比旋光度法进行了多糖组分的纯度鉴定。2.采用凝胶过滤法对多糖组分的相对分子量进行测定;采用气相色谱分析得到多糖组分的单糖组成和单糖摩尔比;通过红外光谱分析得到多糖组分的糖苷键构型。3.对沙枣多糖均一组分进行免疫活性研究,包括小鼠免疫器官重量的影响的研究、单核巨噬细胞吞噬功能(碳粒廓清速率)的测定、小鼠血清溶血素的检测和迟发型超敏反应(DTH)检测。同时对三种均一组分的抗氧化活性进行了研究,包括对DPPH·和·OH的清除能力。结果:1. DM-18型大孔吸附树脂的最佳吸附条件为:上样液浓度为2.0mg/mL,上样液pH值为7.0,上样速率为1.5BV/h,上样量为3.0BV;最佳的解吸条件为:洗脱剂乙醇浓度为35%、洗脱速率为1.0BV/h、洗脱剂用量为4.0BV、洗脱剂乙醇pH值为7.0。2.依次使用DM-18型大孔树脂、DEAE-52纤维素、葡聚糖G-100凝胶柱层析分离得到了六个沙枣多糖的组分,透析除杂后,进行均一组分的纯度鉴定。采用紫外-可见分光光度法,在200~400nm波长范围内均没有吸收,表明六个组分均不含蛋白质和核酸;采用凝胶色谱法和比旋光度法对这六个组分进行纯度鉴定,结果表明PEA-1、PEA-3、 PEA-6三个组分为均一多糖。3.测得PEA-1、PEA-3、 PEA-6的相对分子质量分别为:873747、286169、14656。通过气相色谱分析得到三种均一组分的单糖组成和各单糖的摩尔比,其中PEA-1含有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖6种单糖,单糖的摩尔比为1.3︰0.56︰0.26︰1.0︰1.0︰2.26;PEA-3含有鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖4种单糖,单糖的摩尔比为1.86︰0.99︰6.27︰5.68;PEA-6含有鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖5种单糖,单糖的摩尔比6.4︰0.33︰1.05︰6.0︰3.19。通过红外光谱分析,确定三种组分均含有多糖特征吸收峰,组分PEA-1中含有α-糖苷键,主要为呋喃糖形式;组分PEA-3含有β-糖苷键,主要为吡喃糖形式;组分PEA-6含有α-糖苷键,主要为呋喃糖形式。4.沙枣多糖均一组分对环磷酰胺作用下的小鼠具有免疫调节作用,且具有一定的抗氧化活性,对DPPH·和·OH都有一定的清除能力。结论:本论文分离纯化得到了三种沙枣多糖均一组分,测定得到均一组分的相对分子质量,通过气相色谱确定了单糖组成和各单糖摩尔比,通过红外光谱确定了均一组分的糖苷键构型,研究确定了沙枣多糖均一组分对小鼠具有免疫调节作用,同时也具有一定的抗氧化活性。