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第一部分:5例STAT1基因突变患儿的临床及免疫学研究目的:分析5例STAT1基因突变患儿的临床表现、免疫学特点以及p-STAT1和STAT1蛋白的表达情况。方法:以2017年9月到2018年1月在我院免疫科收治的5例STAT1基因突变的患儿及家属为研究对象,收集5例患儿的临床资料并分析其临床特征。采用流式细胞术检测淋巴细胞各亚群的数量和T淋巴细胞的增殖功能;采用PCR技术检测STAT1基因、TCR Vβ亚家族克隆谱和TRECs的含量;采用Western Blot检测p-STAT1和STAT1蛋白的表达。结果:(1)5例患儿中,P1、P4和P5确诊为STAT1功能获得型突变,P2和P3确诊为STAT1功能缺失型突变;(2)5例患儿中,P1、P2、P4和P5临床表现均为CMCD,其中P5合并有甲状腺功能低下,P3的临床表现为MSMD;(3)5例患儿的TCR多样性都有不同程度的受限,胸腺输出功能降低;(4)流式细胞术检测淋巴细胞亚群数量显示:CD4~~+T细胞比例降低,其中主要为初始CD4~~+T细胞和效应记忆CD4~~+T细胞的降低、B细胞亚群中主要为记忆B细胞和浆母B细胞的降低、Th17细胞比例降低和T细胞增殖功能(P2和P4降低,P1、P3和P5正常);(5)Western Blot检测显示:P1、P4和P5的p-STAT1蛋白表达量升高,P2和P3的p-STAT1蛋白表达量减少,其中P2母的蛋白表达量也减少,但无临床症状。结论:5例患儿均以Th17的数量下降为突出表现并伴有不同程度的免疫功能受损,其中3例为STAT1功能获得型突变,2例为STAT1功能缺失型突变,可通过基因检测STAT1突变和Western Blot检测p-STAT1蛋白的表达量来诊断。第二部分:20例川崎病患儿精细免疫分型分析及其临床意义目的:分析急性期川崎病(KD)患儿淋巴细胞各亚群的数量变化,探讨对临床诊治的意义。方法:前瞻性分析我院免疫科收治的20例急性期KD患儿的临床资料以及外周血淋巴细胞各亚群(CD3~+、CD4~+及各亚群、CD8~+及各亚群、TCRαβ~+DNT、TCRγδ~+、CD4/CD8、CD19~+及各亚群、CD16~+CD56)的数量,并选取20例健康儿童为对照组,比较2组间的变化并分析临床指标与淋巴细胞各亚群的关系。结果:20例患儿的临床表现均符合典型KD的诊断标准,与对照组相比,KD组的CD8 Naive、TCRαβ~+DNT、CD4/CD8、CD19~+及各亚群水平均明显升高(P<0.05),而CD4 EM(CD4~+CD45RA-effector memory T cells)、CD4 Temra(CD4~+CD45RA~+effector memory T cells)、CD8~+T、CD8 CM(CD8~+CD45RA-central memory T cells)、CD8 Temra(CD8~+CD45RA~+effector memory T cells)、CD16~+CD56水平明显降低(P<0.05)。有冠状动脉损害的KD患儿与未出现冠状动脉损害KD患儿相比,TCRγδ~+T细胞水平明显升高(P<0.05),CD4 Temra细胞水平有下降趋势。合并呼吸道或消化道系统并发症的KD患儿与未合并呼吸道或消化道系统并发症的KD患儿相比,CD3~+T、CD8 CM、CD8 EM、CD8 Temra细胞水平明显下降(P<0.05),Transitional B细胞水平明显升高(P<0.05)。结论:急性期KD患儿的T、B淋巴细胞均处于异常活化的状态,其中TCRγδ~+T和CD4 Temra细胞与川崎病合并冠状动脉损害相关,CD3~+T、CD8 CM、CD8 EM、CD8 Temra和Transitional B细胞与川崎病合并呼吸道或消化道系统并发症相关。