论文部分内容阅读
萜类环化酶的研究推动了萜类物质的生物合成的研究。然而由于含有萜类结构的杂合生源的化合物鲜见报道，所以关于此类杂合生源化合物的环化酶的研究还未见报道。
少孢节丛孢(Arthrobotrys oligospora)是研究捕食线虫真菌的模式菌株。本研究以少孢节丛孢为材料，研究捕食线虫真菌的次生代谢产物及生物活性和生态学作用。并探讨了少孢节丛孢(A.oligospora)中新骨架化合物的可能生物合成途径。
本研究从少孢节丛孢YMF1.3170的PDB培养物中共分离到11个化合物，其中8个为新化合物，均为少孢节丛孢中特有的法尼基环已烷类杂合生源化合物，包括一类新骨架的少孢素类化合物。
杀线虫活性测试发现化合物对秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)没有毒杀作用。抗菌活性测试表明化合物8在测试浓度为50μg/滤纸片时，对枯草芽孢杆菌3.34表现出较强的抑制活性。对真菌生长和形态的生物活性测试表明化合物2能抑制菌株自身的生长及二维菌网的形成，但能促进孢子的形成;化合物4和5的作用则刚好相反，他们能抑制孢子的产生。化合物2能增加少孢节丛孢抵抗细菌的能力，推测化合物2及4，5可能参与调控少孢节丛孢的生长与防御，扮演着群体感应分子的作用，在与环境中的微生物竞争生态位的活动中起着重要的作用。
由于法尼基环已烷类杂合生源化合物1-8之间的结构相似性和关联性，我们探讨了化合物4和5的生物合成途径，并开展了从化合物2合成化合物4和5的关键酶基因的研究。采用基因敲除的方法研究少孢节丛孢中杂合生源化合物的环化酶，构建了敲除载体，并进行了原生质体转化。
本论文的创新点:
1从少孢节丛孢中分离到8个新化合物，包括一类新骨架的少孢素类化合物，并对这些化合物的生物学功能及生态学意义进行了初步研究。
2对新骨架的少孢素类次生代谢产物的合成途径进行了初步研究，并构建了可能关键合成酶基因的敲除载体。