益母草碱对大鼠血液学和免疫功能的影响

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:treef620
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目的:本研究以SD大鼠为主要试验动物,益母草碱为主要试验药品,通过给SD大鼠灌胃益母草碱,探讨不同剂量益母草碱对大鼠血液和免疫功能的影响;通过建立大鼠免疫抑制模型,探索益母草碱对免疫抑制模型大鼠的免疫调节作用,进一步为益母草碱今后的临床应用提供理论依据。方法:(1)将50只体重为200±20g的SD大鼠随机分成5组,分别为空白对照组、益母草碱低剂量组(15 mg/kg)、益母草碱中剂量组(30mg/kg)、益母草碱高剂量组(60mg/kg)、阳性对照组(丹参滴丸),每组10只,灌胃给药1周,试验结束后腹主动脉采血,测定大鼠的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)以及血浆纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体、凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)和血栓调节蛋白(TM)含量。(2)将50只体重为200±20g的SD大鼠随机分成5组,分别为空白对照组、益母草碱低剂量组(15 mg/kg)、益母草碱中剂量组(30 mg/kg)、益母草碱高剂量组(60mg/kg)、阳性对照组(黄芪多糖),灌胃给药1周。试验结束后分别测定大鼠免疫器官指数(胸腺、脾脏)、血清溶血素、ELISA法检测血清IgA、IgG、IgM和细胞因子(IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ)含量,荧光定量 PCR 检测大鼠脾脏 IFN-γ、IL-4、T-bet 和 GATA-3 mRNA相对表达水平。(3)将50只体重为200±20g的SD大鼠随机分成5组,分别为空白对照组、模型组(环磷酰胺组)、环磷酰胺+益母草碱低剂量组(15mg/kg)、环磷酰胺+益母草碱中剂量组(30 mg/kg)和环磷酰胺+益母草碱高剂量组(60mg/kg),除空白对照组外,其余4组大鼠建立免疫抑制大鼠模型在试验前3天腹腔注射环磷酰胺(50mg/kg/d),从第11天开始灌胃给药一周。试验结束后测定大鼠免疫器官指数(胸腺、脾脏)、ELISA法检测血清IgA、IgG、IgM和细胞因子(IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ)含量,荧光定量PCR检测大鼠脾脏IFN-γ、IL-4、T-bet、GATA-3 mRNA相对表达水平,Western Blot检测大鼠脾脏T-bet、GATA-3蛋白表达水平。结果:(1)与空白对照组相比,15 mg/kg益母草碱可显著延长PT(P<0.05),显著降低D-二聚体含量(P<0.05),显著升高血浆TM含量(P<0.05);30 mg/kg益母草碱可显著延长PT、APTT、TT(P<0.05),显著降低FIB含量(P<0.05),极显著降低D-二聚体的含量(P<0.01)。60mg/kg益母草碱可极显著延长PT(P<0.01),显著延长TT(P<0.05),显著降低FIB含量(P<0.05),极显著降低血浆中D-二聚体的含量(P<0.01)。(2)与空白对照组相比,15 mg/kg益母草碱仅可显著升高血清IgG水平(P<0.05);30mg/kg益母草碱可显著提升胸腺指数(P<0.05),显著提升血清IgG和IgM水平(P<0.05),显著降低血清细胞因子TNF-α含量(P<0.05),显著升高IFN-γ含量(P<0.05);60 mg/kg益母草碱显著提升了大鼠脾脏指数和胸腺指数(P<0.05),显著升高血清溶血素水平(P<0.05),升高血清IgG、IgA和IgM和细胞因子(IL-2、IL-4和IFN-γ)水平(P<0.05),显著降低血清TNF-α含量(P<0.05)。(3)与空白对照组相比,模型组大鼠的脾脏指数和胸腺指数显著降低(P<0.05),血清IgG、IgA和IgM和细胞因子(IL-2、IL-4和IFN-γ)水平显著降低(P<0.05),血清细胞因子TNF-α含量显著升高(P<0.05),大鼠脾脏IFN-γ、T-betmRNA表达量显著降低(P<0.05),IL4、GATA-3 mRNA 表达量显著升高(P<0.05),IFN-γ/IL-4和 T-bet/GATA-3 显著降低(P<0.05),大鼠脾脏T-bet蛋白表达水平显著降低(P<0.05),GATA-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组相比,15 mg/kg益母草碱用药后血清细胞因子IL-2和IL-4显著升高(P<0.05),大鼠脾脏IFN-γ mRNA表达量显著升高(P<0.05),GATA-3 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),大鼠脾脏T-bet蛋白表达水平显著升高(P<0.05),GATA-3蛋白表达水平显著降低(P<0.05);30 mg/kg益母草碱用药后显著升高大鼠脾脏指数和胸腺指数(P<0.05),显著升高血清IgM含量(P<0.05),显著升高血清细胞因子IL-2和IL-4(P<0.05),显著降低TNF-α(P<0.05),显著升高大鼠脾脏IFN-γ mRNA表达水平(P<0.05),显著降低IL-4和GATA-3 mRNA表达水平(P<0.05),T-bet/GATA-3显著升高(P<0.05),大鼠脾脏T-bet蛋白表达水平显著升高(P<0.05),GATA-3蛋白表达水平显著降低(P<0.05);60 mg/kg益母草碱用药后显著升高大鼠脾脏指数和胸腺指数(P<0.05),升高血清IgG、IgA和IgM和细胞因子(IL-2、IL-4和IFN-y)水平(P<0.05),显著降低血清TNF-α含量(P<0.05),显著升高大鼠脾脏IFN-γ和T-betmRNA表达水平(P<0.05),显著降低IL-4 和 GATA-3 mRNA 表达水平(P<0.05),IFN-γ/IL-4 和 T-bet/GATA-3 显著升高(P<0.05)大鼠脾脏T-bet蛋白表达水平显著升高(P<0.05),GATA-3蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:(1)益母草碱在浓度为30mg/kg和60mg/kg时对大鼠有良好的抗凝血作用。(2)益母草碱在浓度为30mg/kg和60mg/kg时可提升正常大鼠免疫功能。(3)益母草碱在浓度为30 mg/kg和60mg/kg时可提升免疫抑制大鼠免疫功能。
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