shRNA干扰HIF-1α对人宫颈癌细胞黏附分子表达的影响

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目的在细胞和移植瘤水平研究shRNA干扰低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1, HIF-1α)对人宫颈腺癌HeLa细胞中黏附分子CD44v6及上皮型钙粘素(E-cad herin)表达的影响,初步探讨其可能机制。方法将人宫颈癌Hela细胞株(记为H0细胞)、转染pGenesil-1空白质粒的HeLa细胞株(记为H1细胞)及转染HIF-1α-shRNA质粒的HeLa细胞株(记为H2细胞)分别行常氧培养及1%O2低氧培养,应用Western blotting检测每组HeLa细胞中HIF-1α、CD44v6、E-cadherin及β-连接素(β-catenin)在细胞水平的表达情况。应用免疫组织化学法检测HIF-1α、CD44v6、E-cadherin及β-catenin在上述3种HeLa细胞裸鼠移植瘤模型组织水平的表达情况。结果Western blotting分析显示,H0和H1细胞低氧组检测到HIF–1α、β-catenin、CD44v6蛋白呈强阳性,而E-cadherin表达减弱,常氧状态下H0、H1和H2组及低氧下H2组HIF-1α未表达,E-cadherin表达呈阳性。免疫组化分析发现H0及H1组移植瘤中HIF-1α、E-cadherin、β-catenin及CD44v6的表达分别为0.651±0.057、0.198±0.015、0.465±0.061及0.687±0.102,0.671±0.069、0.201±0.020、0.452±0.038及0.701±0.071,H2组移植瘤中分别为0.194±0.023、0.548±0.045、0.421±0.052及0.187±0.057,H2组与H0和H1组间HIF-1α、E-cadherin及CD44v6的表达差异有统计学意义(P<0.05);相关性分析提示HIF-1α与E-cadherin、CD44v6的表达有一定相关性。结论通过shRNA干扰抑制人宫颈癌HeLa细胞HIF-1α,可一定程度上下调低氧环境中宫颈癌HeLa细胞黏附分子CD44v6及上调E-cadherin的表达。
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