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拔牙位点保存术(ARP Alveolar ridges preservation/site preservation)是指在拔牙期间或拔牙术后,采取的能减少牙槽骨吸收以保存软硬组织解剖形态并能促进牙槽骨新骨形成的方法。骨组织工程(Bone tissue engineering,BTE)应用组织工程技术在体外人工培养具有生物活性的组织,再将其植入体内缺损组织,以恢复、维持、或改善缺损组织并使其重建功能。成骨细胞特异性多肽是本课题组前期研究成果,以人颅骨成骨细胞为阳性靶细胞,人牙龈成纤维细胞为阴性吸附细胞,采用以噬菌体为载体的噬菌体随机肽库筛选方法,对噬菌体展示十二肽库进行全细胞差减筛选获得的。氨基酸序列为VLAVPWSEPGYL,具有结构简单、易消毒储存、良好的生物相容性等优点。本实验将β-磷酸三钙与成骨细胞特异性多肽复合植入兔拔牙窝内,以评价该成骨细胞特异性多肽在拔牙窝位点保存中的成骨作用,以期为位点保存技术提供新的方法及种植术区骨量不足的问题提供新的思路和方法。具体内容如下:第一部分:β-磷酸三钙/成骨细胞特异性多肽复合材料的制备以二甲基亚砜(1ul/mg)为溶剂溶解多肽粉剂,加入去离子水配制多肽质量浓度为160ug/ml,无菌条件下在超净工作台上0.22um滤膜过滤除菌。将β-TCP支架放到成骨细胞特异性多肽多肽溶液中,轻微震荡以确保成骨细胞特异性多肽多肽溶液充分吸附到β-TCP中,室温条件下放置24h,植入拔牙窝缺损区。扫描电镜见β-磷酸三钙的三维空间及微小空隙。第二部分:建立兔拔牙窝位点保存缺损动物模型27只健康新西兰兔,建立右下颌中切牙拔牙窝位点保存缺损模型。随机分组,实验组植入β-磷酸三钙/成骨细胞特异性多肽复合物,材料组植入β-磷酸三钙(骨粉),空白组不植入任何材料及药物。术后4、8、12周活体行CBCT扫描、离体标本口腔X线扫描、HE染色检测成骨效果。结果表明:1:术后4、8、12周X线测量剩余牙槽嵴相对长度(剩余牙槽嵴相对长度=拔牙侧剩余牙槽长度/非拔牙侧剩余牙槽长度)可见:实验组剩余牙槽嵴相对长度大于材料组及空白组,材料组大于空白组,且各组之间的比较具有统计学意义(P<0.05)。2:术后4、8、12周活体CBCT横截面重建可见:随着时间推移,实验组和对照组材料逐渐降解,新生骨量增加,骨密度增高。12周时实验组材料已完全降解,拔牙窝基本修复,新生骨与周围骨质基本融合;对照组支架材料仍有少量未降解,新生骨密度较周围正常骨质低,但优于空白组。3:术后4、8、12周组织形态学观察可见:实验组拔牙窝内成骨细胞较活跃,新生骨量明显强于材料组及空白组。结论:成骨细胞特异性多肽可促进兔拔牙窝的骨再生与修复,达到拔牙窝位点保存的目的。